中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2007年
10期
968-970
,共3页
强华%蒋燕成%朱波%谢曼凌%吴小茜
彊華%蔣燕成%硃波%謝曼凌%吳小茜
강화%장연성%주파%사만릉%오소천
粪肠球菌%溶血素%原核表达
糞腸毬菌%溶血素%原覈錶達
분장구균%용혈소%원핵표체
目的 克隆表达粪肠球菌溶血素cylL基因,为制备单抗、开发疫苗及其致病机制研究奠定基础.方法 从粪肠球菌中扩增溶血素cylL基因,相应酶切后,克隆到原核表达载体pET42a中,构建pET-cylL重组质粒.将pET-cylL质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3).经KpnI、XhoI酶切及测序鉴定,以IPTG诱导表达融合蛋白,用SDS-PAGE、Western blot进行分析.结果 PCR体外扩增cylL基因产物约206bp,成功构建了重组表达质粒pET-cylL;SDS-PAGE、Western免疫印迹显示蛋白表达带的分子量约为39.6kD.结论 成功构建粪肠球菌溶血素cylL基因的重组表达质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.
目的 剋隆錶達糞腸毬菌溶血素cylL基因,為製備單抗、開髮疫苗及其緻病機製研究奠定基礎.方法 從糞腸毬菌中擴增溶血素cylL基因,相應酶切後,剋隆到原覈錶達載體pET42a中,構建pET-cylL重組質粒.將pET-cylL質粒轉化入大腸桿菌BL21(DE3).經KpnI、XhoI酶切及測序鑒定,以IPTG誘導錶達融閤蛋白,用SDS-PAGE、Western blot進行分析.結果 PCR體外擴增cylL基因產物約206bp,成功構建瞭重組錶達質粒pET-cylL;SDS-PAGE、Western免疫印跡顯示蛋白錶達帶的分子量約為39.6kD.結論 成功構建糞腸毬菌溶血素cylL基因的重組錶達質粒,併在大腸桿菌BL21(DE3)中錶達.
목적 극륭표체분장구균용혈소cylL기인,위제비단항、개발역묘급기치병궤제연구전정기출.방법 종분장구균중확증용혈소cylL기인,상응매절후,극륭도원핵표체재체pET42a중,구건pET-cylL중조질립.장pET-cylL질립전화입대장간균BL21(DE3).경KpnI、XhoI매절급측서감정,이IPTG유도표체융합단백,용SDS-PAGE、Western blot진행분석.결과 PCR체외확증cylL기인산물약206bp,성공구건료중조표체질립pET-cylL;SDS-PAGE、Western면역인적현시단백표체대적분자량약위39.6kD.결론 성공구건분장구균용혈소cylL기인적중조표체질립,병재대장간균BL21(DE3)중표체.
