中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
9期
19-23
,共5页
陈炫%汤绍辉%查庆兵%唐晖%刘芳
陳炫%湯紹輝%查慶兵%唐暉%劉芳
진현%탕소휘%사경병%당휘%류방
铜绿假单胞菌%LexA%复性
銅綠假單胞菌%LexA%複性
동록가단포균%LexA%복성
目的:对LexA蛋白复性方法进行优化,对复性后的LexA蛋白的生物学活性进行分析.方法:采用含有GSH/GSSG的缓冲液,一步稀释法对变性LexA蛋白进行复性,用镍离子亲合柱及阳离子柱层析法对复性后的LexA蛋白进行纯化,再以Sephadex G-25凝胶柱脱盐,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和RP-HPLC法检测复性效果,Western blot分析复性前后及经DTT处理后的LexA蛋白的免疫反应性,凝胶滞留电泳试验检测复性LexA蛋白与DNA的特异性结合能力.结果:复性后的LexA蛋白出现单体和多聚体的形式,多聚体是由单条肽链聚合而成.LexA单体和多聚体与兔抗LexA多克隆抗体均有较好的反应性.复性后的LexA蛋白能与SOS盒序列发生特异性结合.
目的:對LexA蛋白複性方法進行優化,對複性後的LexA蛋白的生物學活性進行分析.方法:採用含有GSH/GSSG的緩遲液,一步稀釋法對變性LexA蛋白進行複性,用鎳離子親閤柱及暘離子柱層析法對複性後的LexA蛋白進行純化,再以Sephadex G-25凝膠柱脫鹽,採用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳和RP-HPLC法檢測複性效果,Western blot分析複性前後及經DTT處理後的LexA蛋白的免疫反應性,凝膠滯留電泳試驗檢測複性LexA蛋白與DNA的特異性結閤能力.結果:複性後的LexA蛋白齣現單體和多聚體的形式,多聚體是由單條肽鏈聚閤而成.LexA單體和多聚體與兔抗LexA多剋隆抗體均有較好的反應性.複性後的LexA蛋白能與SOS盒序列髮生特異性結閤.
목적:대LexA단백복성방법진행우화,대복성후적LexA단백적생물학활성진행분석.방법:채용함유GSH/GSSG적완충액,일보희석법대변성LexA단백진행복성,용얼리자친합주급양리자주층석법대복성후적LexA단백진행순화,재이Sephadex G-25응효주탈염,채용비변성취병희선알응효전영화RP-HPLC법검측복성효과,Western blot분석복성전후급경DTT처리후적LexA단백적면역반응성,응효체류전영시험검측복성LexA단백여DNA적특이성결합능력.결과:복성후적LexA단백출현단체화다취체적형식,다취체시유단조태련취합이성.LexA단체화다취체여토항LexA다극륭항체균유교호적반응성.복성후적LexA단백능여SOS합서렬발생특이성결합.
