辽宁中医药大学学报
遼寧中醫藥大學學報
료녕중의약대학학보
JOURNAL OF LIAONING COLLEGE OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2008年
10期
163-165
,共3页
融合型自杀基因%Fcy::Fur%逆转录病毒%胶质瘤细胞
融閤型自殺基因%Fcy::Fur%逆轉錄病毒%膠質瘤細胞
융합형자살기인%Fcy::Fur%역전록병독%효질류세포
目的:构建含融合自杀基因Fcy::Fur重组逆转录病毒,用自杀基因治疗系统Fcy::Fur/5-氟胞嘧啶(5-FC)对裸鼠胶质瘤进行体内抑瘤作用的实验研究.方法:扩增Fcy::Fur基因并构建Fcy::Fur基因重组逆转录病毒载体:载体转染包装细胞获得高滴度病毒并转染鼠胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆;构建稞鼠荷胶质瘤动物模型,腹腔注射5-FC,观察裸鼠肿瘤重量变化及电镜、流式细胞仪(FCM)检测肿瘤的凋亡.结果:PCR法扩增出全长Fcy::Pur基因,经测序证实序列正确;构建了PLXSN-Fcy::Fur逆转录病毒载体,裁体转染包装细胞PT67,获得滴度为3.5×106 CFU/ml的逆转录病毒:转染C6获转基因阳性克隆C6-Fcy::Fur,检测C6-Fcy::Fur有Fcy::Fur基因的mRNA表达;裸鼠前肢背部接种转基因细胞,成瘤后腹腔注射5-FC,转基因肿瘤的生长较对照组明显抑制.FCM法检测到凋亡峰,电镜观察到转基因肿瘤细胞有凋亡小体.结论:AdE1CMVCD与5-FC联合在体内对胶质瘤有明显的抑制作用,为临床胶质瘤基因治疗提供了可靠的理论及应用依据.
目的:構建含融閤自殺基因Fcy::Fur重組逆轉錄病毒,用自殺基因治療繫統Fcy::Fur/5-氟胞嘧啶(5-FC)對裸鼠膠質瘤進行體內抑瘤作用的實驗研究.方法:擴增Fcy::Fur基因併構建Fcy::Fur基因重組逆轉錄病毒載體:載體轉染包裝細胞穫得高滴度病毒併轉染鼠膠質瘤細胞C6,篩選併鑒定暘性轉基因剋隆;構建稞鼠荷膠質瘤動物模型,腹腔註射5-FC,觀察裸鼠腫瘤重量變化及電鏡、流式細胞儀(FCM)檢測腫瘤的凋亡.結果:PCR法擴增齣全長Fcy::Pur基因,經測序證實序列正確;構建瞭PLXSN-Fcy::Fur逆轉錄病毒載體,裁體轉染包裝細胞PT67,穫得滴度為3.5×106 CFU/ml的逆轉錄病毒:轉染C6穫轉基因暘性剋隆C6-Fcy::Fur,檢測C6-Fcy::Fur有Fcy::Fur基因的mRNA錶達;裸鼠前肢揹部接種轉基因細胞,成瘤後腹腔註射5-FC,轉基因腫瘤的生長較對照組明顯抑製.FCM法檢測到凋亡峰,電鏡觀察到轉基因腫瘤細胞有凋亡小體.結論:AdE1CMVCD與5-FC聯閤在體內對膠質瘤有明顯的抑製作用,為臨床膠質瘤基因治療提供瞭可靠的理論及應用依據.
목적:구건함융합자살기인Fcy::Fur중조역전록병독,용자살기인치료계통Fcy::Fur/5-불포밀정(5-FC)대라서효질류진행체내억류작용적실험연구.방법:확증Fcy::Fur기인병구건Fcy::Fur기인중조역전록병독재체:재체전염포장세포획득고적도병독병전염서효질류세포C6,사선병감정양성전기인극륭;구건과서하효질류동물모형,복강주사5-FC,관찰라서종류중량변화급전경、류식세포의(FCM)검측종류적조망.결과:PCR법확증출전장Fcy::Pur기인,경측서증실서렬정학;구건료PLXSN-Fcy::Fur역전록병독재체,재체전염포장세포PT67,획득적도위3.5×106 CFU/ml적역전록병독:전염C6획전기인양성극륭C6-Fcy::Fur,검측C6-Fcy::Fur유Fcy::Fur기인적mRNA표체;라서전지배부접충전기인세포,성류후복강주사5-FC,전기인종류적생장교대조조명현억제.FCM법검측도조망봉,전경관찰도전기인종류세포유조망소체.결론:AdE1CMVCD여5-FC연합재체내대효질류유명현적억제작용,위림상효질류기인치료제공료가고적이론급응용의거.
