生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
631-634
,共4页
王惠君%和丽岗%夏志强%王海燕%付瑜华%卢诚%王文泉
王惠君%和麗崗%夏誌彊%王海燕%付瑜華%盧誠%王文泉
왕혜군%화려강%하지강%왕해연%부유화%로성%왕문천
橡胶%扩增片段长度多态性%基因组DNA%银染
橡膠%擴增片段長度多態性%基因組DNA%銀染
상효%확증편단장도다태성%기인조DNA%은염
目的:扩增片段长度多态性(AFLP)为遗传图谱的构建及育种的辅助选择提供了有力的工具.建立一套适合橡胶树的AFLP技术优化体系.方法:以197个GT1×IAN873橡胶树杂交群体为材料,通过对影响AFLP的多种关键因素如模板DNA质量、酶切连接体系、酶切连接反应时间、预扩增体系、选择性体系的分析进行研究.结果与结论:找出一套适于热带植物基因组DNA提取及橡胶树AFLP技术.用改进的CTAB法,经多次抽提纯化,用细玻璃棒挑出DNA得到高质量的模板DNA;酶切连接时DNA模板为250 ng,反应体系采用各3 U的EcoR Ⅰ/MseⅡ/T4连接酶,反应时间为9 h;预扩增模板为稀释1/2的酶切连接产物,用量为1μL;选择性扩增要用稀释至1/20的预扩增产物.
目的:擴增片段長度多態性(AFLP)為遺傳圖譜的構建及育種的輔助選擇提供瞭有力的工具.建立一套適閤橡膠樹的AFLP技術優化體繫.方法:以197箇GT1×IAN873橡膠樹雜交群體為材料,通過對影響AFLP的多種關鍵因素如模闆DNA質量、酶切連接體繫、酶切連接反應時間、預擴增體繫、選擇性體繫的分析進行研究.結果與結論:找齣一套適于熱帶植物基因組DNA提取及橡膠樹AFLP技術.用改進的CTAB法,經多次抽提純化,用細玻璃棒挑齣DNA得到高質量的模闆DNA;酶切連接時DNA模闆為250 ng,反應體繫採用各3 U的EcoR Ⅰ/MseⅡ/T4連接酶,反應時間為9 h;預擴增模闆為稀釋1/2的酶切連接產物,用量為1μL;選擇性擴增要用稀釋至1/20的預擴增產物.
목적:확증편단장도다태성(AFLP)위유전도보적구건급육충적보조선택제공료유력적공구.건립일투괄합상효수적AFLP기술우화체계.방법:이197개GT1×IAN873상효수잡교군체위재료,통과대영향AFLP적다충관건인소여모판DNA질량、매절련접체계、매절련접반응시간、예확증체계、선택성체계적분석진행연구.결과여결론:조출일투괄우열대식물기인조DNA제취급상효수AFLP기술.용개진적CTAB법,경다차추제순화,용세파리봉도출DNA득도고질량적모판DNA;매절련접시DNA모판위250 ng,반응체계채용각3 U적EcoR Ⅰ/MseⅡ/T4련접매,반응시간위9 h;예확증모판위희석1/2적매절련접산물,용량위1μL;선택성확증요용희석지1/20적예확증산물.
