南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2007年
7期
1041-1043
,共3页
郭振辉%唐柚青%赖添顺%洪新%毛宝龄%钱桂生
郭振輝%唐柚青%賴添順%洪新%毛寶齡%錢桂生
곽진휘%당유청%뢰첨순%홍신%모보령%전계생
人脐静脉内皮细胞%核因子-κB%细胞间粘附分子-1%肿瘤坏死因子α%免疫组化%凝胶电泳迁移率改变分析
人臍靜脈內皮細胞%覈因子-κB%細胞間粘附分子-1%腫瘤壞死因子α%免疫組化%凝膠電泳遷移率改變分析
인제정맥내피세포%핵인자-κB%세포간점부분자-1%종류배사인자α%면역조화%응효전영천이솔개변분석
目的 探讨血管内皮细胞激活表达细胞间粘附分子(ICAM-1),及核因子-κB(NF-κB)对其表达调控的作用.方法 通过建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)体外培养,观察TNFα刺激HUVEC后,采用凝胶电泳迁移率改变分析法检测NF-κB活化强度和应用免疫组化方法检测HUVEC表达ICAM-1.结果 HUVEC受TNFα刺激后2～12 h NF-κB的活性显著增高(P＜0.01),峰值在刺激后6 h;同时ICAM-1表达显著增强(P＜0.01),并于12 h达峰值,NF-κB活化与ICAM-1表达之间有峰值水平和时间顺序的正相关.且NF-κB可与含ICAM-1基因的κB序列的寡聚核苷酸系列特异结合;竞争抑制实验进一步证实了NF-κB与标记的κB系列结合的特异性;超迁移试验表明,与κB系列结合的NF-κB是由P65亚基构成的同源二聚体.结论 TNFα可有效地激活HUVEC高效表达ICAM-1,其表达受P65亚基同源二聚体构成的NF-κB调控.
目的 探討血管內皮細胞激活錶達細胞間粘附分子(ICAM-1),及覈因子-κB(NF-κB)對其錶達調控的作用.方法 通過建立人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)體外培養,觀察TNFα刺激HUVEC後,採用凝膠電泳遷移率改變分析法檢測NF-κB活化彊度和應用免疫組化方法檢測HUVEC錶達ICAM-1.結果 HUVEC受TNFα刺激後2～12 h NF-κB的活性顯著增高(P＜0.01),峰值在刺激後6 h;同時ICAM-1錶達顯著增彊(P＜0.01),併于12 h達峰值,NF-κB活化與ICAM-1錶達之間有峰值水平和時間順序的正相關.且NF-κB可與含ICAM-1基因的κB序列的寡聚覈苷痠繫列特異結閤;競爭抑製實驗進一步證實瞭NF-κB與標記的κB繫列結閤的特異性;超遷移試驗錶明,與κB繫列結閤的NF-κB是由P65亞基構成的同源二聚體.結論 TNFα可有效地激活HUVEC高效錶達ICAM-1,其錶達受P65亞基同源二聚體構成的NF-κB調控.
목적 탐토혈관내피세포격활표체세포간점부분자(ICAM-1),급핵인자-κB(NF-κB)대기표체조공적작용.방법 통과건립인제정맥내피세포(HUVEC)체외배양,관찰TNFα자격HUVEC후,채용응효전영천이솔개변분석법검측NF-κB활화강도화응용면역조화방법검측HUVEC표체ICAM-1.결과 HUVEC수TNFα자격후2～12 h NF-κB적활성현저증고(P＜0.01),봉치재자격후6 h;동시ICAM-1표체현저증강(P＜0.01),병우12 h체봉치,NF-κB활화여ICAM-1표체지간유봉치수평화시간순서적정상관.차NF-κB가여함ICAM-1기인적κB서렬적과취핵감산계렬특이결합;경쟁억제실험진일보증실료NF-κB여표기적κB계렬결합적특이성;초천이시험표명,여κB계렬결합적NF-κB시유P65아기구성적동원이취체.결론 TNFα가유효지격활HUVEC고효표체ICAM-1,기표체수P65아기동원이취체구성적NF-κB조공.
