复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2007年
3期
317-322
,共6页
陈明亮%王琪%董生福%秦智强%张健%韩聪%沈旭%瞿涤
陳明亮%王琪%董生福%秦智彊%張健%韓聰%瀋旭%瞿滌
진명량%왕기%동생복%진지강%장건%한총%침욱%구조
福氏志贺菌%组氨酸蛋白激酶%表面等离子共振
福氏誌賀菌%組氨痠蛋白激酶%錶麵等離子共振
복씨지하균%조안산단백격매%표면등리자공진
目的 初步研究福氏志贺菌组氨酸蛋白激酶EnvZ抑制剂对福氏志贺菌毒力的影响.方法 通过构建志贺菌EnvZ胞内段(SF-EnvZc)蛋白的原核表达质粒,表达并纯化SF-EnvZc蛋白,在SPECS公司的小分子化合物库中模拟筛选出的10个候选EnvZ抑制剂的基础上,通过体外磷酸化的方法筛选出能够有效地抑制SF-EnvZc蛋白磷酸化的小分子化合物(EnvZ抑制剂),然后采用表面等离子共振(SPR)技术检测EnvZ抑制剂与SF-EnvZc蛋白的结合力,并采用小鼠角结膜志贺菌感染模型检测EnvZ抑制剂对福氏志贺菌株Sf9380毒力的影响.结果 在10个候选EnvZ抑制剂中,化合物1、2、3能够有效地抑制SF-EnvZc蛋白的磷酸化,其IC50值分别为(70.17±5.83)、(10.18±0.86)和(37.66±9.64)μmol/L,且上述3个化合物表现出对SF-EnvZc蛋白的高亲和力,其平衡解离常数(Kd)分别为4.08、3.57和2.94 μmol/L,其中化合物1和2能够明显抑制福氏志贺菌株Sf9380导致的小鼠角结膜炎症反应(由+++变为-),化合物3能够明显降低其炎症反应(由+++降为+),化合物1、2、3的最小有效浓度分别为12.5、12.5和100μmol/L.结论 筛选出3个EnvZ抑制剂,化合物1、2、3能够不同程度地抑制或降低福氏志贺菌导致的小鼠角结膜炎症反应,提示EnvZ抑制剂能够降低福氏志贺菌的毒力.
目的 初步研究福氏誌賀菌組氨痠蛋白激酶EnvZ抑製劑對福氏誌賀菌毒力的影響.方法 通過構建誌賀菌EnvZ胞內段(SF-EnvZc)蛋白的原覈錶達質粒,錶達併純化SF-EnvZc蛋白,在SPECS公司的小分子化閤物庫中模擬篩選齣的10箇候選EnvZ抑製劑的基礎上,通過體外燐痠化的方法篩選齣能夠有效地抑製SF-EnvZc蛋白燐痠化的小分子化閤物(EnvZ抑製劑),然後採用錶麵等離子共振(SPR)技術檢測EnvZ抑製劑與SF-EnvZc蛋白的結閤力,併採用小鼠角結膜誌賀菌感染模型檢測EnvZ抑製劑對福氏誌賀菌株Sf9380毒力的影響.結果 在10箇候選EnvZ抑製劑中,化閤物1、2、3能夠有效地抑製SF-EnvZc蛋白的燐痠化,其IC50值分彆為(70.17±5.83)、(10.18±0.86)和(37.66±9.64)μmol/L,且上述3箇化閤物錶現齣對SF-EnvZc蛋白的高親和力,其平衡解離常數(Kd)分彆為4.08、3.57和2.94 μmol/L,其中化閤物1和2能夠明顯抑製福氏誌賀菌株Sf9380導緻的小鼠角結膜炎癥反應(由+++變為-),化閤物3能夠明顯降低其炎癥反應(由+++降為+),化閤物1、2、3的最小有效濃度分彆為12.5、12.5和100μmol/L.結論 篩選齣3箇EnvZ抑製劑,化閤物1、2、3能夠不同程度地抑製或降低福氏誌賀菌導緻的小鼠角結膜炎癥反應,提示EnvZ抑製劑能夠降低福氏誌賀菌的毒力.
목적 초보연구복씨지하균조안산단백격매EnvZ억제제대복씨지하균독력적영향.방법 통과구건지하균EnvZ포내단(SF-EnvZc)단백적원핵표체질립,표체병순화SF-EnvZc단백,재SPECS공사적소분자화합물고중모의사선출적10개후선EnvZ억제제적기출상,통과체외린산화적방법사선출능구유효지억제SF-EnvZc단백린산화적소분자화합물(EnvZ억제제),연후채용표면등리자공진(SPR)기술검측EnvZ억제제여SF-EnvZc단백적결합력,병채용소서각결막지하균감염모형검측EnvZ억제제대복씨지하균주Sf9380독력적영향.결과 재10개후선EnvZ억제제중,화합물1、2、3능구유효지억제SF-EnvZc단백적린산화,기IC50치분별위(70.17±5.83)、(10.18±0.86)화(37.66±9.64)μmol/L,차상술3개화합물표현출대SF-EnvZc단백적고친화력,기평형해리상수(Kd)분별위4.08、3.57화2.94 μmol/L,기중화합물1화2능구명현억제복씨지하균주Sf9380도치적소서각결막염증반응(유+++변위-),화합물3능구명현강저기염증반응(유+++강위+),화합물1、2、3적최소유효농도분별위12.5、12.5화100μmol/L.결론 사선출3개EnvZ억제제,화합물1、2、3능구불동정도지억제혹강저복씨지하균도치적소서각결막염증반응,제시EnvZ억제제능구강저복씨지하균적독력.
