环境与职业医学
環境與職業醫學
배경여직업의학
CHINESE JOURNAL OF ENVIRONMENTAL & OCCUPATIONAL MEDICINE
2007年
2期
180-182,189
,共4页
α-硫辛酸%活性氧%抗氧化%DNA氧化损伤
α-硫辛痠%活性氧%抗氧化%DNA氧化損傷
α-류신산%활성양%항양화%DNA양화손상
[目的]探讨α-硫辛酸(α-lipoic acid,LA)对外源性促氧化剂H2O2诱导中国仓鼠肺细胞(Chinese hamster lung cells,CHL)的活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平以及DNA氧化损伤的影响.[方法]①胞质内活性氧检测:用H2O2作外源性促氧化剂诱导细胞活性氧升高,以2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorofluorescindiacetate,DCFH-DA)作为荧光信号标记物捕获胞质内活性氧,设置两种反应体系:体系Ⅰ为H2O2+LA,作用20 min;体系Ⅱ为Fe2++LA,分别作用2、4、8 h;借助流式细胞仪检测荧光信号强度.②单细胞凝胶电泳(Single cell gel electrophoresis,SCGE):用H2O2染毒细胞,诱发DNA氧化损伤,同时在反应体系中加入不同浓度LA反应2h,单细胞凝胶电泳分析DNA氧化损伤情况.[结果]ROS:①反应体系Ⅰ:H2O2引发细胞内活性氧骤升,但LA使活性氧水平剂量依赖性降低.②反应体系Ⅱ:Fe2+诱导胞质内活性氧升高,LA能抑制活性氧,降低荧光信号强度.100 μmol/L Fe2+诱导细胞活性氧升高,并随时间增加而增强;LA能降低并持续抑制100 μmol/LFe2+诱导的活性氧升高,但未表现出明显的浓度依赖性.SCGE:H2O2造成细胞DNA断裂损伤,彗星率、彗星尾长、尾部DNA含量、olive尾矩等指标值均升高;加入LA后使上述各指标值剂量依赖性下降.[结论]LA能清除活性氧,抑制Fe2+诱导的活性氧升高,表现出剂量-反应关系和时间-效应关系;可能的机制为直接清除活性氧、阻断Fe2+介导的Fenton反应.LA发挥抗氧化作用,剂量依赖性降低H2O2诱导的DNA氧化损伤.
[目的]探討α-硫辛痠(α-lipoic acid,LA)對外源性促氧化劑H2O2誘導中國倉鼠肺細胞(Chinese hamster lung cells,CHL)的活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平以及DNA氧化損傷的影響.[方法]①胞質內活性氧檢測:用H2O2作外源性促氧化劑誘導細胞活性氧升高,以2',7'-二氯熒光素二乙痠酯(2',7'-dichlorofluorescindiacetate,DCFH-DA)作為熒光信號標記物捕穫胞質內活性氧,設置兩種反應體繫:體繫Ⅰ為H2O2+LA,作用20 min;體繫Ⅱ為Fe2++LA,分彆作用2、4、8 h;藉助流式細胞儀檢測熒光信號彊度.②單細胞凝膠電泳(Single cell gel electrophoresis,SCGE):用H2O2染毒細胞,誘髮DNA氧化損傷,同時在反應體繫中加入不同濃度LA反應2h,單細胞凝膠電泳分析DNA氧化損傷情況.[結果]ROS:①反應體繫Ⅰ:H2O2引髮細胞內活性氧驟升,但LA使活性氧水平劑量依賴性降低.②反應體繫Ⅱ:Fe2+誘導胞質內活性氧升高,LA能抑製活性氧,降低熒光信號彊度.100 μmol/L Fe2+誘導細胞活性氧升高,併隨時間增加而增彊;LA能降低併持續抑製100 μmol/LFe2+誘導的活性氧升高,但未錶現齣明顯的濃度依賴性.SCGE:H2O2造成細胞DNA斷裂損傷,彗星率、彗星尾長、尾部DNA含量、olive尾矩等指標值均升高;加入LA後使上述各指標值劑量依賴性下降.[結論]LA能清除活性氧,抑製Fe2+誘導的活性氧升高,錶現齣劑量-反應關繫和時間-效應關繫;可能的機製為直接清除活性氧、阻斷Fe2+介導的Fenton反應.LA髮揮抗氧化作用,劑量依賴性降低H2O2誘導的DNA氧化損傷.
[목적]탐토α-류신산(α-lipoic acid,LA)대외원성촉양화제H2O2유도중국창서폐세포(Chinese hamster lung cells,CHL)적활성양(Reactive oxygen species,ROS)수평이급DNA양화손상적영향.[방법]①포질내활성양검측:용H2O2작외원성촉양화제유도세포활성양승고,이2',7'-이록형광소이을산지(2',7'-dichlorofluorescindiacetate,DCFH-DA)작위형광신호표기물포획포질내활성양,설치량충반응체계:체계Ⅰ위H2O2+LA,작용20 min;체계Ⅱ위Fe2++LA,분별작용2、4、8 h;차조류식세포의검측형광신호강도.②단세포응효전영(Single cell gel electrophoresis,SCGE):용H2O2염독세포,유발DNA양화손상,동시재반응체계중가입불동농도LA반응2h,단세포응효전영분석DNA양화손상정황.[결과]ROS:①반응체계Ⅰ:H2O2인발세포내활성양취승,단LA사활성양수평제량의뢰성강저.②반응체계Ⅱ:Fe2+유도포질내활성양승고,LA능억제활성양,강저형광신호강도.100 μmol/L Fe2+유도세포활성양승고,병수시간증가이증강;LA능강저병지속억제100 μmol/LFe2+유도적활성양승고,단미표현출명현적농도의뢰성.SCGE:H2O2조성세포DNA단렬손상,혜성솔、혜성미장、미부DNA함량、olive미구등지표치균승고;가입LA후사상술각지표치제량의뢰성하강.[결론]LA능청제활성양,억제Fe2+유도적활성양승고,표현출제량-반응관계화시간-효응관계;가능적궤제위직접청제활성양、조단Fe2+개도적Fenton반응.LA발휘항양화작용,제량의뢰성강저H2O2유도적DNA양화손상.
