CAJ | 학술논문

目的研究成人骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)体外分化为血管内皮细胞的能力并探讨其诱导条件.方法分离成人骨髓单个核细胞,经贴壁法获取MSCs.所获细胞分4组进行诱导:组1、2以5×103/cm2细胞密度接分别接种于含2%和15%胎牛血清的L-DMEM培养基;组3、4以5×104/cm2细胞密度分别接种于上述两种血清浓度的培养基,各组细胞经血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)辅以牛脑提取物的诱导,对照组为正常传代培养的MSCs.在诱导的第14、21天分别测定表面分子CD34、VEGFR-2、CD31和Ⅷ因子相关抗原(factor Ⅷ-related antigen,又称von Willebrand factor, vWF)以及体外成血管实验对分化细胞进行鉴定,同时测定不同诱导条件下的细胞增殖指数(proliferation index,PI).结果组3细胞经诱导后,内皮系表面分子CD34、VEGFR-2、CD31、vWF于第14天均有不同程度表达,分别为8.5%、12.0%、40.0%、30.0%,其中CD34、VEGFR-2在第21天表达上调,为15.5%、20.0%,余各诱导组细胞未表达上述表面分子;诱导后的组3细胞呈低增殖状态(PI值约为10.4%),在半固体培养基中还可形成血管腔样结构.结论从成人骨髓中分离培养的MSCs,在较高细胞接种密度和低增殖状态下,经VEGF、牛脑垂体提取物诱导后,可分化为血管内皮细胞,可作为治疗性血管生成及组织工程理想的种子细胞.
목적 연구성인골수간충질간세포(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)체외분화위혈관내피세포적능력병탐토기유도조건.방법 분리성인골수단개핵세포,경첩벽법획취MSCs.소획세포분4조진행유도:조1、2이5×103/cm2세포밀도접분별접충우함2%화15%태우혈청적L-DMEM배양기;조3、4이5×104/cm2세포밀도분별접충우상술량충혈청농도적배양기,각조세포경혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)보이우뇌제취물적유도,대조조위정상전대배양적MSCs.재유도적제14、21천분별측정표면분자CD34、VEGFR-2、CD31화Ⅷ인자상관항원(factor Ⅷ-related antigen,우칭von Willebrand factor, vWF)이급체외성혈관실험대분화세포진행감정,동시측정불동유도조건하적세포증식지수(proliferation index,PI).결과 조3세포경유도후,내피계표면분자CD34、VEGFR-2、CD31、vWF우제14천균유불동정도표체,분별위8.5%、12.0%、40.0%、30.0%,기중CD34、VEGFR-2재제21천표체상조,위15.5%、20.0%,여각유도조세포미표체상술표면분자;유도후적조3세포정저증식상태(PI치약위10.4%),재반고체배양기중환가형성혈관강양결구.결론 종성인골수중분리배양적MSCs,재교고세포접충밀도화저증식상태하,경VEGF、우뇌수체제취물유도후,가분화위혈관내피세포,가작위치료성혈관생성급조직공정이상적충자세포.