生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2009年
1期
17-19
,共3页
郭庆水%朱中元%罗越华%王海波%黄惜%刘贤杰
郭慶水%硃中元%囉越華%王海波%黃惜%劉賢傑
곽경수%주중원%라월화%왕해파%황석%류현걸
结核分枝杆菌%16kDa%表达%纯化
結覈分枝桿菌%16kDa%錶達%純化
결핵분지간균%16kDa%표체%순화
目的:构建融合表达GST和结核分枝杆菌16kDa蛋白的表达系统,摸索表达条件及制备方法.方法:根据16kDa蛋白的基因序列设计引物,从结核菌基因组DNA中扩增该基因,酶切后插入表达载体,测序证实后转入大肠杆菌JM109菌株,经IPTG诱导表达,产物经谷胱甘肽-琼脂糖凝胶法纯化.结果:16kDa基因产物大小、酶切片断大小和载体的大小与设计一致、16kDa基因测序的结果与目的基因完全符合.表达纯化的蛋白的大小与蛋白质分子量标准相比较一致.结论:构建的表达载体成功,纯化的蛋白即为目的蛋白.
目的:構建融閤錶達GST和結覈分枝桿菌16kDa蛋白的錶達繫統,摸索錶達條件及製備方法.方法:根據16kDa蛋白的基因序列設計引物,從結覈菌基因組DNA中擴增該基因,酶切後插入錶達載體,測序證實後轉入大腸桿菌JM109菌株,經IPTG誘導錶達,產物經穀胱甘肽-瓊脂糖凝膠法純化.結果:16kDa基因產物大小、酶切片斷大小和載體的大小與設計一緻、16kDa基因測序的結果與目的基因完全符閤.錶達純化的蛋白的大小與蛋白質分子量標準相比較一緻.結論:構建的錶達載體成功,純化的蛋白即為目的蛋白.
목적:구건융합표체GST화결핵분지간균16kDa단백적표체계통,모색표체조건급제비방법.방법:근거16kDa단백적기인서렬설계인물,종결핵균기인조DNA중확증해기인,매절후삽입표체재체,측서증실후전입대장간균JM109균주,경IPTG유도표체,산물경곡광감태-경지당응효법순화.결과:16kDa기인산물대소、매절편단대소화재체적대소여설계일치、16kDa기인측서적결과여목적기인완전부합.표체순화적단백적대소여단백질분자량표준상비교일치.결론:구건적표체재체성공,순화적단백즉위목적단백.
