新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
1期
54-58
,共5页
王向柳%王长法%杨宏军%阿合买提·买买提%高运东%仲跻峰
王嚮柳%王長法%楊宏軍%阿閤買提·買買提%高運東%仲躋峰
왕향류%왕장법%양굉군%아합매제·매매제%고운동%중제봉
无乳链球菌%CAMP因子%克隆%表达
無乳鏈毬菌%CAMP因子%剋隆%錶達
무유련구균%CAMP인자%극륭%표체
提取能产生CAMP反应的牛源无乳链球菌山东分离株的基因组DNA,PCR扩增CAMP因子基因,重组到pMD18-T载体中.测序结果表明,扩增片断含有768 bp的ORF,可编码含255个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的无乳链球菌CAMP因子蛋白的氨基酸组成相比, 第8位Tyr→Cys,第95位Pro→Ser,第126位Thr→Ala的3个氨基酸发生了点突变,同源性为98.4%.成功构建原核表达载体pET32a+/cfb,SDS-PAGE分析蛋白质表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为48 kD,表达量占菌体总蛋白的52.7%.这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件.
提取能產生CAMP反應的牛源無乳鏈毬菌山東分離株的基因組DNA,PCR擴增CAMP因子基因,重組到pMD18-T載體中.測序結果錶明,擴增片斷含有768 bp的ORF,可編碼含255箇氨基痠的成熟蛋白,與已報道的無乳鏈毬菌CAMP因子蛋白的氨基痠組成相比, 第8位Tyr→Cys,第95位Pro→Ser,第126位Thr→Ala的3箇氨基痠髮生瞭點突變,同源性為98.4%.成功構建原覈錶達載體pET32a+/cfb,SDS-PAGE分析蛋白質錶達水平,IPTG誘導後錶達的融閤蛋白分子量為48 kD,錶達量佔菌體總蛋白的52.7%.這為進一步研究其緻病與免疫機理、疫苗設計提供瞭條件.
제취능산생CAMP반응적우원무유련구균산동분리주적기인조DNA,PCR확증CAMP인자기인,중조도pMD18-T재체중.측서결과표명,확증편단함유768 bp적ORF,가편마함255개안기산적성숙단백,여이보도적무유련구균CAMP인자단백적안기산조성상비, 제8위Tyr→Cys,제95위Pro→Ser,제126위Thr→Ala적3개안기산발생료점돌변,동원성위98.4%.성공구건원핵표체재체pET32a+/cfb,SDS-PAGE분석단백질표체수평,IPTG유도후표체적융합단백분자량위48 kD,표체량점균체총단백적52.7%.저위진일보연구기치병여면역궤리、역묘설계제공료조건.
