第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2006年
5期
385-388
,共4页
宋庆贺%柴玉波%陈苏民%陈南春%黄勇%代忠明
宋慶賀%柴玉波%陳囌民%陳南春%黃勇%代忠明
송경하%시옥파%진소민%진남춘%황용%대충명
脂多糖%应答基因%逆转录聚合酶链反应%基因表达
脂多糖%應答基因%逆轉錄聚閤酶鏈反應%基因錶達
지다당%응답기인%역전록취합매련반응%기인표체
目的:扩增人lrp-cDNA全长编码区、并在大肠杆菌中表达和鉴定.方法:提取脂多糖刺激后HEK293细胞的总RNA,通过RT-PCR的方法扩增出全长人lrp序列,将其克隆入原核表达载体pcTAT后转化大肠杆菌诱导表达,做SDS-PAGE分析;并用免疫印迹法鉴定6His-TAT-LRG融合蛋白表达.结果:测序结果表明,获得了全长人lrp-cDNA全长编码区,其序列与GenBank已经公布的不完全一致;SDS-PAGE分析表明,6His-TAT-Lrp融合蛋白在大肠杆菌中成功表达,表达量约占菌体总蛋白的17%;免疫印迹法鉴定显示,该融合蛋白可与相应抗血清产生阳性反应.结论:得到人lrp-cDNA全长编码区序列,并成功表达,为人lrp功能的深入研究奠定了基础.
目的:擴增人lrp-cDNA全長編碼區、併在大腸桿菌中錶達和鑒定.方法:提取脂多糖刺激後HEK293細胞的總RNA,通過RT-PCR的方法擴增齣全長人lrp序列,將其剋隆入原覈錶達載體pcTAT後轉化大腸桿菌誘導錶達,做SDS-PAGE分析;併用免疫印跡法鑒定6His-TAT-LRG融閤蛋白錶達.結果:測序結果錶明,穫得瞭全長人lrp-cDNA全長編碼區,其序列與GenBank已經公佈的不完全一緻;SDS-PAGE分析錶明,6His-TAT-Lrp融閤蛋白在大腸桿菌中成功錶達,錶達量約佔菌體總蛋白的17%;免疫印跡法鑒定顯示,該融閤蛋白可與相應抗血清產生暘性反應.結論:得到人lrp-cDNA全長編碼區序列,併成功錶達,為人lrp功能的深入研究奠定瞭基礎.
목적:확증인lrp-cDNA전장편마구、병재대장간균중표체화감정.방법:제취지다당자격후HEK293세포적총RNA,통과RT-PCR적방법확증출전장인lrp서렬,장기극륭입원핵표체재체pcTAT후전화대장간균유도표체,주SDS-PAGE분석;병용면역인적법감정6His-TAT-LRG융합단백표체.결과:측서결과표명,획득료전장인lrp-cDNA전장편마구,기서렬여GenBank이경공포적불완전일치;SDS-PAGE분석표명,6His-TAT-Lrp융합단백재대장간균중성공표체,표체량약점균체총단백적17%;면역인적법감정현시,해융합단백가여상응항혈청산생양성반응.결론:득도인lrp-cDNA전장편마구서렬,병성공표체,위인lrp공능적심입연구전정료기출.
