畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2006年
4期
401-407
,共7页
赵武%肖少波%方六荣%江云波%宋云峰%严琳%余晓岚%陈焕春
趙武%肖少波%方六榮%江雲波%宋雲峰%嚴琳%餘曉嵐%陳煥春
조무%초소파%방륙영%강운파%송운봉%엄림%여효람%진환춘
牛疱疹病毒1型VP22%猪繁殖与呼吸综合征病毒%修饰型ORF5基因%ORF6基因%重组伪狂犬病毒
牛皰疹病毒1型VP22%豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%脩飾型ORF5基因%ORF6基因%重組偽狂犬病毒
우포진병독1형VP22%저번식여호흡종합정병독%수식형ORF5기인%ORF6기인%중조위광견병독
为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因工程疫苗,以伪狂犬病毒(PRV)gE基因缺失标志疫苗株TK-/gE-/LacZ+为病毒载体,通过同源重组,构建了共表达与牛疱疹病毒1型VP22(BHV-1 VP22)融合的PRRSV E及M蛋白的重组伪狂犬病毒(rPRV)TK-/gE/VP22E+/VP22M+.经PCR、Southern blot、Westernblot证实rPRV构建正确,并能表达与BHV-1 VP22融合的PRRSV E及M蛋白.rPRV在IBRS-2、PK-15细胞中的增殖滴度与PRV亲本株相比无显著差异,表明外源基因的插入不影响rPRV增殖.用该rPRV免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠抗PRRSV中和抗体及脾淋巴细胞增殖反应,并与未融合VP22的单表达PRRSV E蛋白及共表达E及M蛋白的rPRV TK-/gE-/E+与TK-/gE-/E+/M+进行比较.结果显示TK-/gE-/VP22E+/VP22M+可诱导小鼠产生更好的体液与细胞免疫反应,BHV-1 VP22发挥了佐剂效应.本研究为研制安全、有效的猪繁殖与呼吸综合征-伪狂犬病二价基因工程疫苗奠定了基础.
為瞭研製豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)基因工程疫苗,以偽狂犬病毒(PRV)gE基因缺失標誌疫苗株TK-/gE-/LacZ+為病毒載體,通過同源重組,構建瞭共錶達與牛皰疹病毒1型VP22(BHV-1 VP22)融閤的PRRSV E及M蛋白的重組偽狂犬病毒(rPRV)TK-/gE/VP22E+/VP22M+.經PCR、Southern blot、Westernblot證實rPRV構建正確,併能錶達與BHV-1 VP22融閤的PRRSV E及M蛋白.rPRV在IBRS-2、PK-15細胞中的增殖滴度與PRV親本株相比無顯著差異,錶明外源基因的插入不影響rPRV增殖.用該rPRV免疫BALB/c小鼠,檢測免疫小鼠抗PRRSV中和抗體及脾淋巴細胞增殖反應,併與未融閤VP22的單錶達PRRSV E蛋白及共錶達E及M蛋白的rPRV TK-/gE-/E+與TK-/gE-/E+/M+進行比較.結果顯示TK-/gE-/VP22E+/VP22M+可誘導小鼠產生更好的體液與細胞免疫反應,BHV-1 VP22髮揮瞭佐劑效應.本研究為研製安全、有效的豬繁殖與呼吸綜閤徵-偽狂犬病二價基因工程疫苗奠定瞭基礎.
위료연제저번식여호흡종합정병독(PRRSV)기인공정역묘,이위광견병독(PRV)gE기인결실표지역묘주TK-/gE-/LacZ+위병독재체,통과동원중조,구건료공표체여우포진병독1형VP22(BHV-1 VP22)융합적PRRSV E급M단백적중조위광견병독(rPRV)TK-/gE/VP22E+/VP22M+.경PCR、Southern blot、Westernblot증실rPRV구건정학,병능표체여BHV-1 VP22융합적PRRSV E급M단백.rPRV재IBRS-2、PK-15세포중적증식적도여PRV친본주상비무현저차이,표명외원기인적삽입불영향rPRV증식.용해rPRV면역BALB/c소서,검측면역소서항PRRSV중화항체급비림파세포증식반응,병여미융합VP22적단표체PRRSV E단백급공표체E급M단백적rPRV TK-/gE-/E+여TK-/gE-/E+/M+진행비교.결과현시TK-/gE-/VP22E+/VP22M+가유도소서산생경호적체액여세포면역반응,BHV-1 VP22발휘료좌제효응.본연구위연제안전、유효적저번식여호흡종합정-위광견병이개기인공정역묘전정료기출.
