微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
1期
28-32
,共5页
何健%黄星%顾立锋%蒋建东%李顺鹏
何健%黃星%顧立鋒%蔣建東%李順鵬
하건%황성%고립봉%장건동%리순붕
四氢嘧啶%ectABC基因%SEFA-PCR%Halomonas sp.BYS-1%盐激表达
四氫嘧啶%ectABC基因%SEFA-PCR%Halomonas sp.BYS-1%鹽激錶達
사경밀정%ectABC기인%SEFA-PCR%Halomonas sp.BYS-1%염격표체
利用SEFA-PCR技术从中度嗜盐菌Halomonas sp.BYS-1总DNA中克隆了四氢嘧啶合成基因ectABC及其上游序列(GenBank accession number DQ017757);OMIGA软件分析结果显示ectA、ectB、ectC位于同一个操纵子上,大小分别为573bp、1251bp和387bp,预测编码的DAT(L-二氨基丁酸转氨酶)、DAA(L-二氨基丁酸乙酰转移酶)和ES(四氢嘧啶合酶)大小分别为21.1kDa(191 amino acid)、45.7kDa(417 amino acid)和14.5kDa(129 amino acid);将包含ectABC基因及其上游1000bp序列的片段克隆到pUC19中并转化E.coli DH5α,转化子E.coli(pUC19ECT)能够在盐激条件下合成四氢嘧啶,但其耐盐能力没有得到显著改善.
利用SEFA-PCR技術從中度嗜鹽菌Halomonas sp.BYS-1總DNA中剋隆瞭四氫嘧啶閤成基因ectABC及其上遊序列(GenBank accession number DQ017757);OMIGA軟件分析結果顯示ectA、ectB、ectC位于同一箇操縱子上,大小分彆為573bp、1251bp和387bp,預測編碼的DAT(L-二氨基丁痠轉氨酶)、DAA(L-二氨基丁痠乙酰轉移酶)和ES(四氫嘧啶閤酶)大小分彆為21.1kDa(191 amino acid)、45.7kDa(417 amino acid)和14.5kDa(129 amino acid);將包含ectABC基因及其上遊1000bp序列的片段剋隆到pUC19中併轉化E.coli DH5α,轉化子E.coli(pUC19ECT)能夠在鹽激條件下閤成四氫嘧啶,但其耐鹽能力沒有得到顯著改善.
이용SEFA-PCR기술종중도기염균Halomonas sp.BYS-1총DNA중극륭료사경밀정합성기인ectABC급기상유서렬(GenBank accession number DQ017757);OMIGA연건분석결과현시ectA、ectB、ectC위우동일개조종자상,대소분별위573bp、1251bp화387bp,예측편마적DAT(L-이안기정산전안매)、DAA(L-이안기정산을선전이매)화ES(사경밀정합매)대소분별위21.1kDa(191 amino acid)、45.7kDa(417 amino acid)화14.5kDa(129 amino acid);장포함ectABC기인급기상유1000bp서렬적편단극륭도pUC19중병전화E.coli DH5α,전화자E.coli(pUC19ECT)능구재염격조건하합성사경밀정,단기내염능력몰유득도현저개선.
