分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2005年
7期
899-903
,共5页
荧光相关光谱%单分子检测%分子扩散
熒光相關光譜%單分子檢測%分子擴散
형광상관광보%단분자검측%분자확산
基于激光共焦构型,构建了一套高灵敏度和高稳定性的荧光相关光谱单分子检测系统.采用高数值孔径物镜使激光束高度聚焦,并用同一物镜收集样品的荧光,单光子计数器用于实时记录荧光信号.优化系统保持物镜焦点、针孔以及单光子计数器光敏区高度同轴.采用60×1.2(NA)的水浸物镜及直径为160 μm的针孔得到的检测系统结构参数为ω0和z0分别为0.42 μm和1.33 μm,照射微区的体积为1.3 fL.单个Rhodamine Green分子可获得13倍的信噪比.用该系统获得了小分子和生物大分子(DNA片段和蛋白质)的高质量荧光相关图谱,成功实现了单个分子的检测.
基于激光共焦構型,構建瞭一套高靈敏度和高穩定性的熒光相關光譜單分子檢測繫統.採用高數值孔徑物鏡使激光束高度聚焦,併用同一物鏡收集樣品的熒光,單光子計數器用于實時記錄熒光信號.優化繫統保持物鏡焦點、針孔以及單光子計數器光敏區高度同軸.採用60×1.2(NA)的水浸物鏡及直徑為160 μm的針孔得到的檢測繫統結構參數為ω0和z0分彆為0.42 μm和1.33 μm,照射微區的體積為1.3 fL.單箇Rhodamine Green分子可穫得13倍的信譟比.用該繫統穫得瞭小分子和生物大分子(DNA片段和蛋白質)的高質量熒光相關圖譜,成功實現瞭單箇分子的檢測.
기우격광공초구형,구건료일투고령민도화고은정성적형광상관광보단분자검측계통.채용고수치공경물경사격광속고도취초,병용동일물경수집양품적형광,단광자계수기용우실시기록형광신호.우화계통보지물경초점、침공이급단광자계수기광민구고도동축.채용60×1.2(NA)적수침물경급직경위160 μm적침공득도적검측계통결구삼수위ω0화z0분별위0.42 μm화1.33 μm,조사미구적체적위1.3 fL.단개Rhodamine Green분자가획득13배적신조비.용해계통획득료소분자화생물대분자(DNA편단화단백질)적고질량형광상관도보,성공실현료단개분자적검측.
