重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2009年
21期
2691-2694
,共4页
张克斌%周小波%光丽霞%周世文%何晓梅%盛哈蕾%钱桂生
張剋斌%週小波%光麗霞%週世文%何曉梅%盛哈蕾%錢桂生
장극빈%주소파%광려하%주세문%하효매%성합뢰%전계생
腺病毒%柯萨奇-腺病毒受体%胞外区%蛋白表达与纯化%Western-blotting
腺病毒%柯薩奇-腺病毒受體%胞外區%蛋白錶達與純化%Western-blotting
선병독%가살기-선병독수체%포외구%단백표체여순화%Western-blotting
目的 在大肠杆菌中表达人源性柯萨奇病毒-腺病毒受体胞外区蛋白(exCAR),纯化表达蛋白并进行Western-blotting鉴定.方法 从Hela细胞株中扩增exCAR基因片段,连接至表达质粒pET-28a(+)构建为重组质粒pET-28a-exCAR,转化至大肠杆菌BL21株中,筛选高表达株,诱导表达,利用Ni+株亲和纯化表达蛋白,SDS-PAGE后,转印PVDF膜后,进行Western-blotting鉴定.结果 获得纯化的大肠杆菌表达蛋白exCAR,表达形式为包涵体,经Western-blotting鉴定为人源性exCAR蛋白.结论 本研究获得了纯化的exCAR表达蛋白,为下一步的蛋白复性和腺病毒感染的阻断实验提供了基础.
目的 在大腸桿菌中錶達人源性柯薩奇病毒-腺病毒受體胞外區蛋白(exCAR),純化錶達蛋白併進行Western-blotting鑒定.方法 從Hela細胞株中擴增exCAR基因片段,連接至錶達質粒pET-28a(+)構建為重組質粒pET-28a-exCAR,轉化至大腸桿菌BL21株中,篩選高錶達株,誘導錶達,利用Ni+株親和純化錶達蛋白,SDS-PAGE後,轉印PVDF膜後,進行Western-blotting鑒定.結果 穫得純化的大腸桿菌錶達蛋白exCAR,錶達形式為包涵體,經Western-blotting鑒定為人源性exCAR蛋白.結論 本研究穫得瞭純化的exCAR錶達蛋白,為下一步的蛋白複性和腺病毒感染的阻斷實驗提供瞭基礎.
목적 재대장간균중표체인원성가살기병독-선병독수체포외구단백(exCAR),순화표체단백병진행Western-blotting감정.방법 종Hela세포주중확증exCAR기인편단,련접지표체질립pET-28a(+)구건위중조질립pET-28a-exCAR,전화지대장간균BL21주중,사선고표체주,유도표체,이용Ni+주친화순화표체단백,SDS-PAGE후,전인PVDF막후,진행Western-blotting감정.결과 획득순화적대장간균표체단백exCAR,표체형식위포함체,경Western-blotting감정위인원성exCAR단백.결론 본연구획득료순화적exCAR표체단백,위하일보적단백복성화선병독감염적조단실험제공료기출.
