牙体牙髓牙周病学杂志
牙體牙髓牙週病學雜誌
아체아수아주병학잡지
CHINESE JOURNAL OF CONSERVATIVE DENTISTRY
2003年
6期
298-300
,共3页
章锦才%俞少杰%张蓉%张蕴惠
章錦纔%俞少傑%張蓉%張蘊惠
장금재%유소걸%장용%장온혜
口腔链球菌%丙酮酸氧化酶%丙酮酸氧化酶基因%调节基因
口腔鏈毬菌%丙酮痠氧化酶%丙酮痠氧化酶基因%調節基因
구강련구균%병동산양화매%병동산양화매기인%조절기인
目的:阐明体外扩增得到的口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因的上游区序列是否即是调控序列,是否具有启动子活性.方法:将口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因调节区PCR扩增产物经Hind Ⅲ酶切,克隆至载体PKK232-8,转化E.coli JM109,通过氯霉素抗性筛选阳性菌落,重新增菌后取质粒DNA,再经酶切鉴定.将重组子点种于不同浓度的氯霉素平板上,37℃培养18 h,观察菌落生长情况,测定重组质粒转化子对氯霉素的抗性水平.结果:筛选得到1个阳性菌落,重组质粒DNA的酶切产物经10 g/L琼脂糖凝胶电泳,表明获得片段的Mr约为1.3 kb,与预计大小相符,证实其为阳性重组克隆.测定重组质粒转化子对氯霉素的抗性水平显示其抗性达1 020 μg/mL.结论:本研究已成功克隆口腔链球菌丙酮酸氧化酶调节基因.
目的:闡明體外擴增得到的口腔鏈毬菌丙酮痠氧化酶基因的上遊區序列是否即是調控序列,是否具有啟動子活性.方法:將口腔鏈毬菌丙酮痠氧化酶基因調節區PCR擴增產物經Hind Ⅲ酶切,剋隆至載體PKK232-8,轉化E.coli JM109,通過氯黴素抗性篩選暘性菌落,重新增菌後取質粒DNA,再經酶切鑒定.將重組子點種于不同濃度的氯黴素平闆上,37℃培養18 h,觀察菌落生長情況,測定重組質粒轉化子對氯黴素的抗性水平.結果:篩選得到1箇暘性菌落,重組質粒DNA的酶切產物經10 g/L瓊脂糖凝膠電泳,錶明穫得片段的Mr約為1.3 kb,與預計大小相符,證實其為暘性重組剋隆.測定重組質粒轉化子對氯黴素的抗性水平顯示其抗性達1 020 μg/mL.結論:本研究已成功剋隆口腔鏈毬菌丙酮痠氧化酶調節基因.
목적:천명체외확증득도적구강련구균병동산양화매기인적상유구서렬시부즉시조공서렬,시부구유계동자활성.방법:장구강련구균병동산양화매기인조절구PCR확증산물경Hind Ⅲ매절,극륭지재체PKK232-8,전화E.coli JM109,통과록매소항성사선양성균락,중신증균후취질립DNA,재경매절감정.장중조자점충우불동농도적록매소평판상,37℃배양18 h,관찰균락생장정황,측정중조질립전화자대록매소적항성수평.결과:사선득도1개양성균락,중조질립DNA적매절산물경10 g/L경지당응효전영,표명획득편단적Mr약위1.3 kb,여예계대소상부,증실기위양성중조극륭.측정중조질립전화자대록매소적항성수평현시기항성체1 020 μg/mL.결론:본연구이성공극륭구강련구균병동산양화매조절기인.
