中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2003年
3期
372-376
,共5页
郭若霖%郑红%郭善一%郭刚%张镜宇
郭若霖%鄭紅%郭善一%郭剛%張鏡宇
곽약림%정홍%곽선일%곽강%장경우
碘缺乏%骨发育%RNA竞争模板%骨形态发生蛋白-2
碘缺乏%骨髮育%RNA競爭模闆%骨形態髮生蛋白-2
전결핍%골발육%RNA경쟁모판%골형태발생단백-2
为更加精确地测定碘缺乏状态下大鼠颅骨组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2) mRNA表达水平,改进竞争性RT-PCR方法,探讨碘缺乏对骨骼发育影响的分子机制.将构建的DNA竞争模板克隆入pSportⅠ质粒中,利用pSportⅠ质粒中所含有的SP6 RNA聚合酶启动子序列,将DNA竞争模板在体外转录成为RNA.以此RNA作为竞争性RT-PCR中的竞争模板,与所提取的总RNA一同进行RT-PCR,消除逆转录效率对定量结果的影响.定量检测碘缺乏和正常大鼠颅骨总RNA中BMP-2 mRNA的水平.碘缺乏大鼠(1 d～84 d)颅骨中BMP-2表达含量明显降低.1 d时降低6.43倍,以后差距逐渐缩小,至84 d相差1.55倍.结果提示,碘缺乏所致的骨骼发育不良与BMP-2表达不足有关,结果首次揭示微量元素碘和甲状腺激素与BMP-2基因表达的调控有关.
為更加精確地測定碘缺乏狀態下大鼠顱骨組織中骨形態髮生蛋白-2(BMP-2) mRNA錶達水平,改進競爭性RT-PCR方法,探討碘缺乏對骨骼髮育影響的分子機製.將構建的DNA競爭模闆剋隆入pSportⅠ質粒中,利用pSportⅠ質粒中所含有的SP6 RNA聚閤酶啟動子序列,將DNA競爭模闆在體外轉錄成為RNA.以此RNA作為競爭性RT-PCR中的競爭模闆,與所提取的總RNA一同進行RT-PCR,消除逆轉錄效率對定量結果的影響.定量檢測碘缺乏和正常大鼠顱骨總RNA中BMP-2 mRNA的水平.碘缺乏大鼠(1 d～84 d)顱骨中BMP-2錶達含量明顯降低.1 d時降低6.43倍,以後差距逐漸縮小,至84 d相差1.55倍.結果提示,碘缺乏所緻的骨骼髮育不良與BMP-2錶達不足有關,結果首次揭示微量元素碘和甲狀腺激素與BMP-2基因錶達的調控有關.
위경가정학지측정전결핍상태하대서로골조직중골형태발생단백-2(BMP-2) mRNA표체수평,개진경쟁성RT-PCR방법,탐토전결핍대골격발육영향적분자궤제.장구건적DNA경쟁모판극륭입pSportⅠ질립중,이용pSportⅠ질립중소함유적SP6 RNA취합매계동자서렬,장DNA경쟁모판재체외전록성위RNA.이차RNA작위경쟁성RT-PCR중적경쟁모판,여소제취적총RNA일동진행RT-PCR,소제역전록효솔대정량결과적영향.정량검측전결핍화정상대서로골총RNA중BMP-2 mRNA적수평.전결핍대서(1 d～84 d)로골중BMP-2표체함량명현강저.1 d시강저6.43배,이후차거축점축소,지84 d상차1.55배.결과제시,전결핍소치적골격발육불량여BMP-2표체불족유관,결과수차게시미량원소전화갑상선격소여BMP-2기인표체적조공유관.
