上海医学
上海醫學
상해의학
SHANGHAI MEDICAL JOURNAL
2000年
2期
84-87
,共4页
于丽莉%赵涵芳%刘军%章有章
于麗莉%趙涵芳%劉軍%章有章
우려리%조함방%류군%장유장
TGFβ1%基因工程%基因表达
TGFβ1%基因工程%基因錶達
TGFβ1%기인공정%기인표체
目的克隆人转化生长因子(TGFβ 1)基因并且在大肠杆菌中表达.方法从人的血小板中抽提总RNA,经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)得到全长TGFβ 1 cDNA,将其克隆于表达质粒pBLMVL2中,构建了在PL启动子控制的含有T GFβ 1 cDNA重组子,转化到大肠杆菌RR1菌株中,进行温敏诱导表达.结果表达产物经SDS-PAGE电泳染色后,显示其相对分子质量为12.5×103,计算机灰度扫描分析,表达产物约占全菌蛋白的20%左右,Western-blot分析证实,表达产物为TGFβ 1,细胞实验显示其具有一定的生物活性.结论在大肠杆菌中表达出具有活性的人TGFβ 1.这为我们下一步研究其功能和临床应用打下了基础.
目的剋隆人轉化生長因子(TGFβ 1)基因併且在大腸桿菌中錶達.方法從人的血小闆中抽提總RNA,經逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)得到全長TGFβ 1 cDNA,將其剋隆于錶達質粒pBLMVL2中,構建瞭在PL啟動子控製的含有T GFβ 1 cDNA重組子,轉化到大腸桿菌RR1菌株中,進行溫敏誘導錶達.結果錶達產物經SDS-PAGE電泳染色後,顯示其相對分子質量為12.5×103,計算機灰度掃描分析,錶達產物約佔全菌蛋白的20%左右,Western-blot分析證實,錶達產物為TGFβ 1,細胞實驗顯示其具有一定的生物活性.結論在大腸桿菌中錶達齣具有活性的人TGFβ 1.這為我們下一步研究其功能和臨床應用打下瞭基礎.
목적극륭인전화생장인자(TGFβ 1)기인병차재대장간균중표체.방법종인적혈소판중추제총RNA,경역전록취합매련반응(RT-PCR)득도전장TGFβ 1 cDNA,장기극륭우표체질립pBLMVL2중,구건료재PL계동자공제적함유T GFβ 1 cDNA중조자,전화도대장간균RR1균주중,진행온민유도표체.결과표체산물경SDS-PAGE전영염색후,현시기상대분자질량위12.5×103,계산궤회도소묘분석,표체산물약점전균단백적20%좌우,Western-blot분석증실,표체산물위TGFβ 1,세포실험현시기구유일정적생물활성.결론재대장간균중표체출구유활성적인TGFβ 1.저위아문하일보연구기공능화림상응용타하료기출.
