第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
1999年
10期
705-708
,共4页
太光平%王裴%陈渝%尤忠义%汪仕良%黎鳌
太光平%王裴%陳渝%尤忠義%汪仕良%黎鼇
태광평%왕배%진투%우충의%왕사량%려오
血清淀粉样蛋白启动子(SAA3)%氯霉素乙酰转移酶(CAT)%LPS%基因治疗
血清澱粉樣蛋白啟動子(SAA3)%氯黴素乙酰轉移酶(CAT)%LPS%基因治療
혈청정분양단백계동자(SAA3)%록매소을선전이매(CAT)%LPS%기인치료
目的:利用构建的血清淀粉样蛋白启动子(SAA3)报告基因表达载体观察SAA3启动子/增强子应用于调控目的基因在培养细胞株的表达及对炎症刺激的响应特性, 探索SAA3用于调控靶基因的可能性.方法:pSAA3CAT3采用脂质体转染U937细胞、肝细胞株SMMC7721,48 h后LPS、重组rIL-6+rIL-1、巨噬细胞活化上清(CM) 攻击、测定不同时间CAT的诱导表达(ELISA法).结果: LPS活化的转染U937细胞,6 h CAT开始表达,24 h达峰值,LPS活化后4.6倍增加CAT基因的表达, 72 h开始下降; 重组rIL-6+rIL-1联合诱导,10%、20%CM诱导转染SMMC7721细胞24 h可启动报告基因表达,20%的条件活化上清诱导作用显著,6 h始启动,36～48 h达峰值,96 h下降;本研究结果显示在0.1～62.5 ng/ml的剂量范围内,rIL-6+rIL-1联合诱导剂量依赖诱导转染U937细胞、SMMC7721 细胞报告基因CAT的表达.结论:本研究证实SAA3 启动子转录调控序列(-306～+47) 可启动 SMMC7721、U937细胞转染报告基因CAT表达,SAA3 启动子适用于构建炎症诱导性表达载体,将为基因治疗的表达调控提供新治疗策略及方法.
目的:利用構建的血清澱粉樣蛋白啟動子(SAA3)報告基因錶達載體觀察SAA3啟動子/增彊子應用于調控目的基因在培養細胞株的錶達及對炎癥刺激的響應特性, 探索SAA3用于調控靶基因的可能性.方法:pSAA3CAT3採用脂質體轉染U937細胞、肝細胞株SMMC7721,48 h後LPS、重組rIL-6+rIL-1、巨噬細胞活化上清(CM) 攻擊、測定不同時間CAT的誘導錶達(ELISA法).結果: LPS活化的轉染U937細胞,6 h CAT開始錶達,24 h達峰值,LPS活化後4.6倍增加CAT基因的錶達, 72 h開始下降; 重組rIL-6+rIL-1聯閤誘導,10%、20%CM誘導轉染SMMC7721細胞24 h可啟動報告基因錶達,20%的條件活化上清誘導作用顯著,6 h始啟動,36～48 h達峰值,96 h下降;本研究結果顯示在0.1～62.5 ng/ml的劑量範圍內,rIL-6+rIL-1聯閤誘導劑量依賴誘導轉染U937細胞、SMMC7721 細胞報告基因CAT的錶達.結論:本研究證實SAA3 啟動子轉錄調控序列(-306～+47) 可啟動 SMMC7721、U937細胞轉染報告基因CAT錶達,SAA3 啟動子適用于構建炎癥誘導性錶達載體,將為基因治療的錶達調控提供新治療策略及方法.
목적:이용구건적혈청정분양단백계동자(SAA3)보고기인표체재체관찰SAA3계동자/증강자응용우조공목적기인재배양세포주적표체급대염증자격적향응특성, 탐색SAA3용우조공파기인적가능성.방법:pSAA3CAT3채용지질체전염U937세포、간세포주SMMC7721,48 h후LPS、중조rIL-6+rIL-1、거서세포활화상청(CM) 공격、측정불동시간CAT적유도표체(ELISA법).결과: LPS활화적전염U937세포,6 h CAT개시표체,24 h체봉치,LPS활화후4.6배증가CAT기인적표체, 72 h개시하강; 중조rIL-6+rIL-1연합유도,10%、20%CM유도전염SMMC7721세포24 h가계동보고기인표체,20%적조건활화상청유도작용현저,6 h시계동,36～48 h체봉치,96 h하강;본연구결과현시재0.1～62.5 ng/ml적제량범위내,rIL-6+rIL-1연합유도제량의뢰유도전염U937세포、SMMC7721 세포보고기인CAT적표체.결론:본연구증실SAA3 계동자전록조공서렬(-306～+47) 가계동 SMMC7721、U937세포전염보고기인CAT표체,SAA3 계동자괄용우구건염증유도성표체재체,장위기인치료적표체조공제공신치료책략급방법.
