南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
8期
1990-1992
,共3页
张曦倩%易艳红%黄翠玉%邢福祺
張晞倩%易豔紅%黃翠玉%邢福祺
장희천%역염홍%황취옥%형복기
绒毛外细胞滋养层细胞%细胞培养%体外侵袭模型
絨毛外細胞滋養層細胞%細胞培養%體外侵襲模型
융모외세포자양층세포%세포배양%체외침습모형
目的 建立绒毛外细胞滋养层细胞(EVCT)体外侵袭模型,为探讨滋养层细胞侵袭调节机制提供实验平台.方法 取健康早孕妇女(孕7～9周)人工流产绒毛组织,利用Percoll梯度离心法及差速贴壁法,将纯化的绒毛外滋养层细胞,按所需浓度接种于涂有Matrigel培养板或24孔Transwell侵入系统中培养.用细胞免疫荧光法检测TGFβ2、cytokeration 7、integrin α1β1.用CCK-8评价细胞生长状况.用Transwell细胞侵入系统检测EVCT的体外侵袭作用.结果 EVCT在Matrigel包被的Petri皿培养4h,用细胞免疫荧光法显示有95%以上的细胞表达TGFβ2、cytokeration 7,integrin α1β1.EVCT在Matrigel培养不同时间后,其生长指数未有明显变化,提示Matrigel对EVCT的生长未见明显影响.EVCT在Transwell侵袭系统中培养不同时间后,根据侵袭细胞的OD值,提示48h细胞侵袭作用达到平台期.结论 本实验成功地建立了EVCT体外侵袭模型,可利用此模型研究滋养层细胞的侵袭机制.从而为研究妊娠生理、妊娠病理、妊娠免疫耐受及正常细胞到肿瘤细胞之间的转化提供了实验平台.
目的 建立絨毛外細胞滋養層細胞(EVCT)體外侵襲模型,為探討滋養層細胞侵襲調節機製提供實驗平檯.方法 取健康早孕婦女(孕7～9週)人工流產絨毛組織,利用Percoll梯度離心法及差速貼壁法,將純化的絨毛外滋養層細胞,按所需濃度接種于塗有Matrigel培養闆或24孔Transwell侵入繫統中培養.用細胞免疫熒光法檢測TGFβ2、cytokeration 7、integrin α1β1.用CCK-8評價細胞生長狀況.用Transwell細胞侵入繫統檢測EVCT的體外侵襲作用.結果 EVCT在Matrigel包被的Petri皿培養4h,用細胞免疫熒光法顯示有95%以上的細胞錶達TGFβ2、cytokeration 7,integrin α1β1.EVCT在Matrigel培養不同時間後,其生長指數未有明顯變化,提示Matrigel對EVCT的生長未見明顯影響.EVCT在Transwell侵襲繫統中培養不同時間後,根據侵襲細胞的OD值,提示48h細胞侵襲作用達到平檯期.結論 本實驗成功地建立瞭EVCT體外侵襲模型,可利用此模型研究滋養層細胞的侵襲機製.從而為研究妊娠生理、妊娠病理、妊娠免疫耐受及正常細胞到腫瘤細胞之間的轉化提供瞭實驗平檯.
목적 건립융모외세포자양층세포(EVCT)체외침습모형,위탐토자양층세포침습조절궤제제공실험평태.방법 취건강조잉부녀(잉7～9주)인공유산융모조직,이용Percoll제도리심법급차속첩벽법,장순화적융모외자양층세포,안소수농도접충우도유Matrigel배양판혹24공Transwell침입계통중배양.용세포면역형광법검측TGFβ2、cytokeration 7、integrin α1β1.용CCK-8평개세포생장상황.용Transwell세포침입계통검측EVCT적체외침습작용.결과 EVCT재Matrigel포피적Petri명배양4h,용세포면역형광법현시유95%이상적세포표체TGFβ2、cytokeration 7,integrin α1β1.EVCT재Matrigel배양불동시간후,기생장지수미유명현변화,제시Matrigel대EVCT적생장미견명현영향.EVCT재Transwell침습계통중배양불동시간후,근거침습세포적OD치,제시48h세포침습작용체도평태기.결론 본실험성공지건립료EVCT체외침습모형,가이용차모형연구자양층세포적침습궤제.종이위연구임신생리、임신병리、임신면역내수급정상세포도종류세포지간적전화제공료실험평태.
