微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2003年
2期
169-173
,共5页
邵伟娟%谢建云%陈鸿书%高诚
邵偉娟%謝建雲%陳鴻書%高誠
소위연%사건운%진홍서%고성
胆型螺旋杆菌%序列分析%Koch准则
膽型螺鏇桿菌%序列分析%Koch準則
담형라선간균%서렬분석%Koch준칙
鉴定分离到的微需氧菌为螺旋杆菌,并对该菌进行分型.小鼠皮下或肌肉注射地塞米松使其免疫抑制,取小鼠肠内容物培养,对分离到的细菌,经油镜、电镜观察.然后提取细菌DNA,用根据螺旋杆菌(Helicobacter sp.)rRNA保守区设计的引物P7/P8进行扩增,并对扩增产物分别用MboI、HhaI、XspI内切酶酶切,酶切产物用10%PAGE分析.再用根据螺旋杆菌胆型(H. bilis)rRNA设计特异引物P7/Pb扩增,将扩增产物测序分析.最后,将该细菌在Scid小鼠上作动物感染.细菌在油镜下呈鸟翼状,电镜下观察到双极鞭毛,无周质纤毛.引物P7/P8扩增出374bp的特异带,此片段能分别被MboI、HhaI、Xsp内切酶酶切.引物P7/Pb扩增出364bp的条带,测得的DNA序列中存在MboI、HhaI、XspI的内切位点,与文献中H.bilis序列比较,同源性为97.5%.动物感染试验符合Koch准则.分离到的细菌确为胆型螺旋杆菌.
鑒定分離到的微需氧菌為螺鏇桿菌,併對該菌進行分型.小鼠皮下或肌肉註射地塞米鬆使其免疫抑製,取小鼠腸內容物培養,對分離到的細菌,經油鏡、電鏡觀察.然後提取細菌DNA,用根據螺鏇桿菌(Helicobacter sp.)rRNA保守區設計的引物P7/P8進行擴增,併對擴增產物分彆用MboI、HhaI、XspI內切酶酶切,酶切產物用10%PAGE分析.再用根據螺鏇桿菌膽型(H. bilis)rRNA設計特異引物P7/Pb擴增,將擴增產物測序分析.最後,將該細菌在Scid小鼠上作動物感染.細菌在油鏡下呈鳥翼狀,電鏡下觀察到雙極鞭毛,無週質纖毛.引物P7/P8擴增齣374bp的特異帶,此片段能分彆被MboI、HhaI、Xsp內切酶酶切.引物P7/Pb擴增齣364bp的條帶,測得的DNA序列中存在MboI、HhaI、XspI的內切位點,與文獻中H.bilis序列比較,同源性為97.5%.動物感染試驗符閤Koch準則.分離到的細菌確為膽型螺鏇桿菌.
감정분리도적미수양균위라선간균,병대해균진행분형.소서피하혹기육주사지새미송사기면역억제,취소서장내용물배양,대분리도적세균,경유경、전경관찰.연후제취세균DNA,용근거라선간균(Helicobacter sp.)rRNA보수구설계적인물P7/P8진행확증,병대확증산물분별용MboI、HhaI、XspI내절매매절,매절산물용10%PAGE분석.재용근거라선간균담형(H. bilis)rRNA설계특이인물P7/Pb확증,장확증산물측서분석.최후,장해세균재Scid소서상작동물감염.세균재유경하정조익상,전경하관찰도쌍겁편모,무주질섬모.인물P7/P8확증출374bp적특이대,차편단능분별피MboI、HhaI、Xsp내절매매절.인물P7/Pb확증출364bp적조대,측득적DNA서렬중존재MboI、HhaI、XspI적내절위점,여문헌중H.bilis서렬비교,동원성위97.5%.동물감염시험부합Koch준칙.분리도적세균학위담형라선간균.
