北京林业大学学报
北京林業大學學報
북경임업대학학보
JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY
2003年
1期
6-9
,共4页
申晓辉%陆海%王沙生%蒋湘宁%Yill Sung Park%M.K.Mahedrappa
申曉輝%陸海%王沙生%蔣湘寧%Yill Sung Park%M.K.Mahedrappa
신효휘%륙해%왕사생%장상저%Yill Sung Park%M.K.Mahedrappa
胆碱单氧化酶%克隆%诱导表达
膽堿單氧化酶%剋隆%誘導錶達
담감단양화매%극륭%유도표체
甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质,在植物体内是以胆碱为底物,经两步氧化而合成的.菠菜中,催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶(Choline Monooxygenase,CMO).为了研究胆碱单氧化酶基因的功能以及转基因植物的抗逆能力,在300 mmol/L高盐浓度(n(NaCl):n(CaCl2)=5.7:1)的条件下,作者分离纯化了菠菜mRNA,经RT-PCR得到全长(1.3kb)胆碱单氧化酶(CMO)cDNA,与已经报道的基因序列相比较,同源性为99%.根据其核苷酸序列推导得到了氨基酸序列.将PCR纯化产物与pET-30a+连接,构建了重组表达载体pETCMO,并转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得高效表达.
甘氨痠甜菜堿是一種非毒性的滲透調節物質,在植物體內是以膽堿為底物,經兩步氧化而閤成的.菠菜中,催化第一步反應的酶為膽堿單氧化酶(Choline Monooxygenase,CMO).為瞭研究膽堿單氧化酶基因的功能以及轉基因植物的抗逆能力,在300 mmol/L高鹽濃度(n(NaCl):n(CaCl2)=5.7:1)的條件下,作者分離純化瞭菠菜mRNA,經RT-PCR得到全長(1.3kb)膽堿單氧化酶(CMO)cDNA,與已經報道的基因序列相比較,同源性為99%.根據其覈苷痠序列推導得到瞭氨基痠序列.將PCR純化產物與pET-30a+連接,構建瞭重組錶達載體pETCMO,併轉化到大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導穫得高效錶達.
감안산첨채감시일충비독성적삼투조절물질,재식물체내시이담감위저물,경량보양화이합성적.파채중,최화제일보반응적매위담감단양화매(Choline Monooxygenase,CMO).위료연구담감단양화매기인적공능이급전기인식물적항역능력,재300 mmol/L고염농도(n(NaCl):n(CaCl2)=5.7:1)적조건하,작자분리순화료파채mRNA,경RT-PCR득도전장(1.3kb)담감단양화매(CMO)cDNA,여이경보도적기인서렬상비교,동원성위99%.근거기핵감산서렬추도득도료안기산서렬.장PCR순화산물여pET-30a+련접,구건료중조표체재체pETCMO,병전화도대장간균BL21(DE3),경IPTG유도획득고효표체.
