第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2001年
9期
1104-1106
,共3页
胡廷徽%温博海%万泽生%俞树荣
鬍廷徽%溫博海%萬澤生%俞樹榮
호정휘%온박해%만택생%유수영
半套式PCR%DNA探针%Q热立克次体
半套式PCR%DNA探針%Q熱立剋次體
반투식PCR%DNA탐침%Q열립극차체
目的建立半套式PCR和DNA探针技术由于检测Q热立克次体.方法依据已知的Q热立克次体的16S和23S rRNA基因及其间区的序列,设计3条引物,建立了扩增16S-23S rRNA基因间区的半套式PCR方法,并将扩增片段制成探针,建立了斑点杂交技术.结果 10株Q热立克次体分离株均可扩增出572 bp的PCR条带,而对照菌都为阴性,此半套式PCR方法的灵敏度高达1 pg;用九里株扩增片段标记后制成的探针,与10个Q热立克次体分离株的全DNA呈阳性杂交,对照菌为阴性,此杂交方法的灵敏度为0.5 ng.结论基于Q热立克次体16S-23S rRNA基因间区的半套式PCR和DNA探针技术具有较好的特异性和灵敏度,可联合应用于Q热的病原学诊断.
目的建立半套式PCR和DNA探針技術由于檢測Q熱立剋次體.方法依據已知的Q熱立剋次體的16S和23S rRNA基因及其間區的序列,設計3條引物,建立瞭擴增16S-23S rRNA基因間區的半套式PCR方法,併將擴增片段製成探針,建立瞭斑點雜交技術.結果 10株Q熱立剋次體分離株均可擴增齣572 bp的PCR條帶,而對照菌都為陰性,此半套式PCR方法的靈敏度高達1 pg;用九裏株擴增片段標記後製成的探針,與10箇Q熱立剋次體分離株的全DNA呈暘性雜交,對照菌為陰性,此雜交方法的靈敏度為0.5 ng.結論基于Q熱立剋次體16S-23S rRNA基因間區的半套式PCR和DNA探針技術具有較好的特異性和靈敏度,可聯閤應用于Q熱的病原學診斷.
목적건립반투식PCR화DNA탐침기술유우검측Q열립극차체.방법의거이지적Q열립극차체적16S화23S rRNA기인급기간구적서렬,설계3조인물,건립료확증16S-23S rRNA기인간구적반투식PCR방법,병장확증편단제성탐침,건립료반점잡교기술.결과 10주Q열립극차체분리주균가확증출572 bp적PCR조대,이대조균도위음성,차반투식PCR방법적령민도고체1 pg;용구리주확증편단표기후제성적탐침,여10개Q열립극차체분리주적전DNA정양성잡교,대조균위음성,차잡교방법적령민도위0.5 ng.결론기우Q열립극차체16S-23S rRNA기인간구적반투식PCR화DNA탐침기술구유교호적특이성화령민도,가연합응용우Q열적병원학진단.
