植物研究
植物研究
식물연구
BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH
2006年
3期
318-322
,共5页
朱柏芳%朱笃%邓荣根%李思光
硃柏芳%硃篤%鄧榮根%李思光
주백방%주독%산영근%리사광
ISSR%引物筛选%穗花杉
ISSR%引物篩選%穗花杉
ISSR%인물사선%수화삼
在研究穗花杉(Amentotaxus aragotaenia)的遗传多样性过程中,为了获得清晰、重复性好ISSR扩增结果,对影响ISSR-PCR的多个因素包括模板浓度、Taq酶的选择和用量、Mg2+和dNTPs浓度及退火温度等指标等进行了筛选和优化,确定了穗花杉ISSR-PCR分析的最适扩增条件:20 μL PCR反应体系中,2 μL 10×Taq酶配套缓冲液,1.8 U Taq聚合酶(上海生工公司),0.2 μmol·L-1引物,0.18 mmol·L-1 dNTP,1.5～2.5 mmol·L-1 MgCl2,10 ng·μL-1模板DNA.用来自不同居群7个个体,以100个ISSR引物进行PCR扩增,筛选出扩增效果较好的10个引物.得到了92个位点,其中45个多态性位点,多态性位点比例为49%.
在研究穗花杉(Amentotaxus aragotaenia)的遺傳多樣性過程中,為瞭穫得清晰、重複性好ISSR擴增結果,對影響ISSR-PCR的多箇因素包括模闆濃度、Taq酶的選擇和用量、Mg2+和dNTPs濃度及退火溫度等指標等進行瞭篩選和優化,確定瞭穗花杉ISSR-PCR分析的最適擴增條件:20 μL PCR反應體繫中,2 μL 10×Taq酶配套緩遲液,1.8 U Taq聚閤酶(上海生工公司),0.2 μmol·L-1引物,0.18 mmol·L-1 dNTP,1.5～2.5 mmol·L-1 MgCl2,10 ng·μL-1模闆DNA.用來自不同居群7箇箇體,以100箇ISSR引物進行PCR擴增,篩選齣擴增效果較好的10箇引物.得到瞭92箇位點,其中45箇多態性位點,多態性位點比例為49%.
재연구수화삼(Amentotaxus aragotaenia)적유전다양성과정중,위료획득청석、중복성호ISSR확증결과,대영향ISSR-PCR적다개인소포괄모판농도、Taq매적선택화용량、Mg2+화dNTPs농도급퇴화온도등지표등진행료사선화우화,학정료수화삼ISSR-PCR분석적최괄확증조건:20 μL PCR반응체계중,2 μL 10×Taq매배투완충액,1.8 U Taq취합매(상해생공공사),0.2 μmol·L-1인물,0.18 mmol·L-1 dNTP,1.5～2.5 mmol·L-1 MgCl2,10 ng·μL-1모판DNA.용래자불동거군7개개체,이100개ISSR인물진행PCR확증,사선출확증효과교호적10개인물.득도료92개위점,기중45개다태성위점,다태성위점비례위49%.
