CAJ | 학술논문

目的比较无血清培养液AIM-V和RPMI1640+胎牛血清(FBS)培养液培养大肠癌患者外周血来源树突状细胞(DCs)的形态和免疫表型,检测DCs对T细胞的活化作用.方法对2003年3月至2004年10月首都医科大学附属北京朝阳医院消化内科收治的10例大肠癌患者,采集其外周血分离单核细胞,分别使用2种细胞培养液进行体外培养.观察细胞形态,检测细胞表面CD1a,CD80,CD86,CD83,CD14及HLA-DR的表达.再用丝裂霉素作用后的DCs作为刺激细胞,按照刺激细胞:反应细胞(S:R)1:1,1:10,1:20,1:40,1:80的比例进行同种异体混合淋巴细胞反应(MLR),检测DCs刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果大肠癌患者外周血单核细胞经2种细胞培养液培养后都可以诱导出DCs.细胞外型均呈毛刺状.细胞均表达CD1a、CD80、CD86和人类白细胞抗原(HLA-DR),不表达CD14、CD83,为不成熟DCs的特点.两组DCs细胞表型表达差异无显著性(P＞0.05).按S:R不同比例进行同种异体MRL所得刺激指数分别为2.7,4.1,3.1,2.5,1.6,表明树突状细胞(DCs)在不同比例下都刺激T细胞增殖.结论使用AIM-V无血清培养液和传统的含FBS细胞培养液均可成功诱导培养大肠癌患者外周血来源的DCs,但使用AIM-V可以降低含血清培养液应用人体后引起的过敏反应等风险,更适合DCs的临床使用,可以替代含血清培养液.MLR结果显示,DCs在各种S:R比例下均有刺激T细胞增殖的能力,但S:R比为1:10时最佳.
목적 비교무혈청배양액AIM-V화RPMI1640+태우혈청(FBS)배양액배양대장암환자외주혈래원수돌상세포(DCs)적형태화면역표형,검측DCs대T세포적활화작용.방법 대2003년3월지2004년10월수도의과대학부속북경조양의원소화내과수치적10례대장암환자,채집기외주혈분리단핵세포,분별사용2충세포배양액진행체외배양.관찰세포형태,검측세포표면CD1a,CD80,CD86,CD83,CD14급HLA-DR적표체.재용사렬매소작용후적DCs작위자격세포,안조자격세포:반응세포(S:R)1:1,1:10,1:20,1:40,1:80적비례진행동충이체혼합림파세포반응(MLR),검측DCs자격동충이체T세포증식적능력.결과 대장암환자외주혈단핵세포경2충세포배양액배양후도가이유도출DCs.세포외형균정모자상.세포균표체CD1a、CD80、CD86화인류백세포항원(HLA-DR),불표체CD14、CD83,위불성숙DCs적특점.량조DCs세포표형표체차이무현저성(P＞0.05).안S:R불동비례진행동충이체MRL소득자격지수분별위2.7,4.1,3.1,2.5,1.6,표명수돌상세포(DCs)재불동비례하도자격T세포증식.결론 사용AIM-V무혈청배양액화전통적함FBS세포배양액균가성공유도배양대장암환자외주혈래원적DCs,단사용AIM-V가이강저함혈청배양액응용인체후인기적과민반응등풍험,경괄합DCs적림상사용,가이체대함혈청배양액.MLR결과현시,DCs재각충S:R비례하균유자격T세포증식적능력,단S:R비위1:10시최가.