中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2007年
6期
463-468
,共6页
刘伟%朱风新%伍巧源%余学清%聂静
劉偉%硃風新%伍巧源%餘學清%聶靜
류위%주풍신%오교원%여학청%섭정
LNX%泛素连接酶%紧密连接%黏附连接
LNX%汎素連接酶%緊密連接%黏附連接
LNX%범소련접매%긴밀련접%점부련접
为阐明泛素连接酶LNX在维持上皮细胞之间连接的作用,构建了四环素诱导表达LNX的MDCK细胞株;以免疫荧光法观察细胞连接蛋白E-钙黏素和ZO-1在细胞内的分布,发现LNX的表达使E-钙黏素和ZO-1在细胞内的分布发生明显改变,大量E-钙黏素和ZO-1聚集在胞浆中,而在细胞膜上的分布则明显减少;透射电镜观察上皮细胞间连接的超微结构显示,LNX的表达导致紧密连接和黏附连接的正常结构消失;用钙离子转换实验检测黏附连接的形成发现,表达LNX的MDCK细胞间的黏附连接形成的速度明显滞后于正常细胞.上述结果表明,LNX的表达影响了E-钙黏素在细胞膜上的正常分布,从而延迟黏附连接复合体的形成,导致上皮细胞间连接结构的异常.
為闡明汎素連接酶LNX在維持上皮細胞之間連接的作用,構建瞭四環素誘導錶達LNX的MDCK細胞株;以免疫熒光法觀察細胞連接蛋白E-鈣黏素和ZO-1在細胞內的分佈,髮現LNX的錶達使E-鈣黏素和ZO-1在細胞內的分佈髮生明顯改變,大量E-鈣黏素和ZO-1聚集在胞漿中,而在細胞膜上的分佈則明顯減少;透射電鏡觀察上皮細胞間連接的超微結構顯示,LNX的錶達導緻緊密連接和黏附連接的正常結構消失;用鈣離子轉換實驗檢測黏附連接的形成髮現,錶達LNX的MDCK細胞間的黏附連接形成的速度明顯滯後于正常細胞.上述結果錶明,LNX的錶達影響瞭E-鈣黏素在細胞膜上的正常分佈,從而延遲黏附連接複閤體的形成,導緻上皮細胞間連接結構的異常.
위천명범소련접매LNX재유지상피세포지간련접적작용,구건료사배소유도표체LNX적MDCK세포주;이면역형광법관찰세포련접단백E-개점소화ZO-1재세포내적분포,발현LNX적표체사E-개점소화ZO-1재세포내적분포발생명현개변,대량E-개점소화ZO-1취집재포장중,이재세포막상적분포칙명현감소;투사전경관찰상피세포간련접적초미결구현시,LNX적표체도치긴밀련접화점부련접적정상결구소실;용개리자전환실험검측점부련접적형성발현,표체LNX적MDCK세포간적점부련접형성적속도명현체후우정상세포.상술결과표명,LNX적표체영향료E-개점소재세포막상적정상분포,종이연지점부련접복합체적형성,도치상피세포간련접결구적이상.
