中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
21期
4007-4011
,共5页
缴富斌%张波%孙晓艳%罗军%季建华
繳富斌%張波%孫曉豔%囉軍%季建華
격부빈%장파%손효염%라군%계건화
肝脏干细胞%卵圆细胞%PDX-1%梯度离心%RIA
肝髒榦細胞%卵圓細胞%PDX-1%梯度離心%RIA
간장간세포%란원세포%PDX-1%제도리심%RIA
背景:原代分离的肝卵圆细胞具有双向分化的能力和橫向分化的可塑性.目的:分离大鼠肝脏卵圆细胞,在化学诱导剂作用下使其定向分化为胰岛素分泌细胞.设计、时间及地点:对照观察细胞实验,于2007-05/2008-01在解放军总医院基础研究部,国家重点实验室完成.材料:SPF级SD大鼠,体质量(120±20)g.方法:采用改良梯度离心法分离、培养大鼠肝卵圆细胞,并行免疫组织化学鉴定.随后将卵圆细胞置于含有诱导剂Nicotimide和高浓度葡萄糖的RPMI 1640培养液继续培养,同时以不含诱导剂的RPMI 1640培养液培养的卵圆细胞作为阴性对照.主要观察指标:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联免疫吸附实验、放射免疫分析检测两组卵圆细胞胰岛素的表达.结果:改良的梯度离心方法分离的细胞具干细胞特点,可形成集落,并且OV6、CD34、Nestin染色呈阳性.分离的大鼠肝卵圆细胞,加入诱导剂Nicotimide和高浓度葡萄糖诱导培养l周后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联免疫吸附、RIA检测均显示胰岛素分泌量远高于不含诱导剂细胞(P<0.05).结论:化学诱导剂Nicotimide和高浓度匍萄糖可以在短时期内作用肝卵圆细胞可启动胰十二指肠同源盒基因-1基因,使之定向分化为胰岛素分泌细胞.
揹景:原代分離的肝卵圓細胞具有雙嚮分化的能力和橫嚮分化的可塑性.目的:分離大鼠肝髒卵圓細胞,在化學誘導劑作用下使其定嚮分化為胰島素分泌細胞.設計、時間及地點:對照觀察細胞實驗,于2007-05/2008-01在解放軍總醫院基礎研究部,國傢重點實驗室完成.材料:SPF級SD大鼠,體質量(120±20)g.方法:採用改良梯度離心法分離、培養大鼠肝卵圓細胞,併行免疫組織化學鑒定.隨後將卵圓細胞置于含有誘導劑Nicotimide和高濃度葡萄糖的RPMI 1640培養液繼續培養,同時以不含誘導劑的RPMI 1640培養液培養的卵圓細胞作為陰性對照.主要觀察指標:採用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、酶聯免疫吸附實驗、放射免疫分析檢測兩組卵圓細胞胰島素的錶達.結果:改良的梯度離心方法分離的細胞具榦細胞特點,可形成集落,併且OV6、CD34、Nestin染色呈暘性.分離的大鼠肝卵圓細胞,加入誘導劑Nicotimide和高濃度葡萄糖誘導培養l週後,SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、酶聯免疫吸附、RIA檢測均顯示胰島素分泌量遠高于不含誘導劑細胞(P<0.05).結論:化學誘導劑Nicotimide和高濃度匍萄糖可以在短時期內作用肝卵圓細胞可啟動胰十二指腸同源盒基因-1基因,使之定嚮分化為胰島素分泌細胞.
배경:원대분리적간란원세포구유쌍향분화적능력화횡향분화적가소성.목적:분리대서간장란원세포,재화학유도제작용하사기정향분화위이도소분비세포.설계、시간급지점:대조관찰세포실험,우2007-05/2008-01재해방군총의원기출연구부,국가중점실험실완성.재료:SPF급SD대서,체질량(120±20)g.방법:채용개량제도리심법분리、배양대서간란원세포,병행면역조직화학감정.수후장란원세포치우함유유도제Nicotimide화고농도포도당적RPMI 1640배양액계속배양,동시이불함유도제적RPMI 1640배양액배양적란원세포작위음성대조.주요관찰지표:채용SDS-취병희선알응효전영、매련면역흡부실험、방사면역분석검측량조란원세포이도소적표체.결과:개량적제도리심방법분리적세포구간세포특점,가형성집락,병차OV6、CD34、Nestin염색정양성.분리적대서간란원세포,가입유도제Nicotimide화고농도포도당유도배양l주후,SDS-취병희선알응효전영、매련면역흡부、RIA검측균현시이도소분비량원고우불함유도제세포(P<0.05).결론:화학유도제Nicotimide화고농도포도당가이재단시기내작용간란원세포가계동이십이지장동원합기인-1기인,사지정향분화위이도소분비세포.
