医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2008年
3期
244-246
,共3页
王素红%韩金祥%王世立%葛鲁娜%孙燕
王素紅%韓金祥%王世立%葛魯娜%孫燕
왕소홍%한금상%왕세립%갈로나%손연
rhOP-1%离子交换色谱%内毒素%鲎试剂
rhOP-1%離子交換色譜%內毒素%鱟試劑
rhOP-1%리자교환색보%내독소%후시제
目的 建立一种去除重组人成骨蛋白(recombination human osteogenic protein-1,rhOP-1)溶液中内毒素的方法.方法 提取包涵体蛋白,经纯化、复性得rhOP-1溶液.此溶液经DEAE离子交换色谱柱,通过线性增加盐浓度方式先将蛋白洗脱,内毒素则由较强盐浓度和NaOH洗脱.收集洗脱峰,用鲎试剂检测其内毒素含量.结果 凝胶法检测rhOP-1溶液在DEAE-琼脂糖色谱柱上样前内毒素含量在限值以上,DEAE-琼脂糖色谱柱洗脱峰的蛋白内毒素含量降到限值以下,而经0.22 μm滤膜除菌的蛋白溶液中内毒素含量在限值以上.结论 rhOP-1蛋白溶液经DEAE-琼脂糖色谱柱洗脱,可得低于内毒素限值的蛋白溶液,因此这种方法可作为一种去除rhOP-1缓冲液中内毒素的方法.
目的 建立一種去除重組人成骨蛋白(recombination human osteogenic protein-1,rhOP-1)溶液中內毒素的方法.方法 提取包涵體蛋白,經純化、複性得rhOP-1溶液.此溶液經DEAE離子交換色譜柱,通過線性增加鹽濃度方式先將蛋白洗脫,內毒素則由較彊鹽濃度和NaOH洗脫.收集洗脫峰,用鱟試劑檢測其內毒素含量.結果 凝膠法檢測rhOP-1溶液在DEAE-瓊脂糖色譜柱上樣前內毒素含量在限值以上,DEAE-瓊脂糖色譜柱洗脫峰的蛋白內毒素含量降到限值以下,而經0.22 μm濾膜除菌的蛋白溶液中內毒素含量在限值以上.結論 rhOP-1蛋白溶液經DEAE-瓊脂糖色譜柱洗脫,可得低于內毒素限值的蛋白溶液,因此這種方法可作為一種去除rhOP-1緩遲液中內毒素的方法.
목적 건립일충거제중조인성골단백(recombination human osteogenic protein-1,rhOP-1)용액중내독소적방법.방법 제취포함체단백,경순화、복성득rhOP-1용액.차용액경DEAE리자교환색보주,통과선성증가염농도방식선장단백세탈,내독소칙유교강염농도화NaOH세탈.수집세탈봉,용후시제검측기내독소함량.결과 응효법검측rhOP-1용액재DEAE-경지당색보주상양전내독소함량재한치이상,DEAE-경지당색보주세탈봉적단백내독소함량강도한치이하,이경0.22 μm려막제균적단백용액중내독소함량재한치이상.결론 rhOP-1단백용액경DEAE-경지당색보주세탈,가득저우내독소한치적단백용액,인차저충방법가작위일충거제rhOP-1완충액중내독소적방법.