食品与生物技术学报
食品與生物技術學報
식품여생물기술학보
JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY
2008年
5期
57-61
,共5页
龚韧%孙艳%王静%霍惠芝%杨海麟%王武
龔韌%孫豔%王靜%霍惠芝%楊海麟%王武
공인%손염%왕정%곽혜지%양해린%왕무
苹果酸脱氢酶%柱层析%纯化%L-苹果酸测定
蘋果痠脫氫酶%柱層析%純化%L-蘋果痠測定
평과산탈경매%주층석%순화%L-평과산측정
设计并优化了从猪心中提取高纯度苹果酸脱氢酶的技术路线,采用组织破碎、二度硫酸铵盐析、DEAE Sepharose F.F.离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 F.F.疏水层析及Sephadex G-75 Fine凝胶过滤等方法进行分离纯化,苹果酸脱氢酶比酶活达1 212.97 U/mg,纯化倍数达122.64倍,酶活力收率为53.64%.Sephadex G-75 Fine凝胶过滤和SDS-PAGE电泳结果显示纯化的苹果酸脱氢酶相对分子质量约为 69 000 ,含有2个亚基,每个亚基的相对分子质量约为 34 000 .以制备的苹果酸脱氢酶和谷草转氨酶配成双酶反应体系,对葡萄酒中L-苹果酸的含量进行了测定;通过标准样品和葡萄酒样品精密度及回收率(93.2%～104%)实验.
設計併優化瞭從豬心中提取高純度蘋果痠脫氫酶的技術路線,採用組織破碎、二度硫痠銨鹽析、DEAE Sepharose F.F.離子交換層析、Phenyl Sepharose 6 F.F.疏水層析及Sephadex G-75 Fine凝膠過濾等方法進行分離純化,蘋果痠脫氫酶比酶活達1 212.97 U/mg,純化倍數達122.64倍,酶活力收率為53.64%.Sephadex G-75 Fine凝膠過濾和SDS-PAGE電泳結果顯示純化的蘋果痠脫氫酶相對分子質量約為 69 000 ,含有2箇亞基,每箇亞基的相對分子質量約為 34 000 .以製備的蘋果痠脫氫酶和穀草轉氨酶配成雙酶反應體繫,對葡萄酒中L-蘋果痠的含量進行瞭測定;通過標準樣品和葡萄酒樣品精密度及迴收率(93.2%～104%)實驗.
설계병우화료종저심중제취고순도평과산탈경매적기술로선,채용조직파쇄、이도류산안염석、DEAE Sepharose F.F.리자교환층석、Phenyl Sepharose 6 F.F.소수층석급Sephadex G-75 Fine응효과려등방법진행분리순화,평과산탈경매비매활체1 212.97 U/mg,순화배수체122.64배,매활력수솔위53.64%.Sephadex G-75 Fine응효과려화SDS-PAGE전영결과현시순화적평과산탈경매상대분자질량약위 69 000 ,함유2개아기,매개아기적상대분자질량약위 34 000 .이제비적평과산탈경매화곡초전안매배성쌍매반응체계,대포도주중L-평과산적함량진행료측정;통과표준양품화포도주양품정밀도급회수솔(93.2%～104%)실험.
