石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2009年
3期
317-320
,共4页
李冬妹%罗先道%王生%潘泽民%罗星%谭晓华%杨磊
李鼕妹%囉先道%王生%潘澤民%囉星%譚曉華%楊磊
리동매%라선도%왕생%반택민%라성%담효화%양뢰
HHV8%K1基因%真核表达载体
HHV8%K1基因%真覈錶達載體
HHV8%K1기인%진핵표체재체
为构建人类8型疱疹病毒(Human herpesvirus 8,HHV-8)K1基因的真核表达载体,采集卡波氏肉瘤(Kaposi's sarcoma,KS)患者血清,采用柱式病毒DNA抽提试剂盒抽提血清中的病毒DNA,采用套式PCR技术检测HHV-8的特异性片断KS330233以判断是否得到了HHV-8 DNA,采用PCR技术扩增HHV8 K1基因并纯化回收,酶切、连接入真核表达载体pcDNA3.1,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆pcDNA3.1/HHV8-K1扩增后,提取质粒,进行双酶切和DNA测序鉴定.结果显示采集了经典型KS血清3例,提取了血清HHV-8DNA,扩增了特异性片断KS330233,测序结果正确提示我们得到了HHV8 DNA,扩增了HHV8 K1基因,构建了pcDNA3.1/HHV8-K1真核表达载体,经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实了其序列的正确性.由此可知:成功构建了pcDNA3.1/HHV8-K1真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定良好的实验基础.
為構建人類8型皰疹病毒(Human herpesvirus 8,HHV-8)K1基因的真覈錶達載體,採集卡波氏肉瘤(Kaposi's sarcoma,KS)患者血清,採用柱式病毒DNA抽提試劑盒抽提血清中的病毒DNA,採用套式PCR技術檢測HHV-8的特異性片斷KS330233以判斷是否得到瞭HHV-8 DNA,採用PCR技術擴增HHV8 K1基因併純化迴收,酶切、連接入真覈錶達載體pcDNA3.1,轉化大腸桿菌DH5α,挑取暘性剋隆pcDNA3.1/HHV8-K1擴增後,提取質粒,進行雙酶切和DNA測序鑒定.結果顯示採集瞭經典型KS血清3例,提取瞭血清HHV-8DNA,擴增瞭特異性片斷KS330233,測序結果正確提示我們得到瞭HHV8 DNA,擴增瞭HHV8 K1基因,構建瞭pcDNA3.1/HHV8-K1真覈錶達載體,經限製性內切酶酶切鑒定及測序分析證實瞭其序列的正確性.由此可知:成功構建瞭pcDNA3.1/HHV8-K1真覈錶達載體,為進一步研究該基因的功能奠定良好的實驗基礎.
위구건인류8형포진병독(Human herpesvirus 8,HHV-8)K1기인적진핵표체재체,채집잡파씨육류(Kaposi's sarcoma,KS)환자혈청,채용주식병독DNA추제시제합추제혈청중적병독DNA,채용투식PCR기술검측HHV-8적특이성편단KS330233이판단시부득도료HHV-8 DNA,채용PCR기술확증HHV8 K1기인병순화회수,매절、련접입진핵표체재체pcDNA3.1,전화대장간균DH5α,도취양성극륭pcDNA3.1/HHV8-K1확증후,제취질립,진행쌍매절화DNA측서감정.결과현시채집료경전형KS혈청3례,제취료혈청HHV-8DNA,확증료특이성편단KS330233,측서결과정학제시아문득도료HHV8 DNA,확증료HHV8 K1기인,구건료pcDNA3.1/HHV8-K1진핵표체재체,경한제성내절매매절감정급측서분석증실료기서렬적정학성.유차가지:성공구건료pcDNA3.1/HHV8-K1진핵표체재체,위진일보연구해기인적공능전정량호적실험기출.
