中华器官移植杂志
中華器官移植雜誌
중화기관이식잡지
CHINESE JOURNAL OF ORGAN TRANSPLANTATION
2007年
9期
517-521
,共5页
刘秉乾%王广有%李胜芝%张志宏%李光三%张立霞%马腾骧
劉秉乾%王廣有%李勝芝%張誌宏%李光三%張立霞%馬騰驤
류병건%왕엄유%리성지%장지굉%리광삼%장립하%마등양
转基因%小鼠%抗原,嗜异性%心室功能,左
轉基因%小鼠%抗原,嗜異性%心室功能,左
전기인%소서%항원,기이성%심실공능,좌
目的 探讨联合转移人α1,2-岩藻糖苷转移酶(HT)和衰变加速因子(DAF)基因对模拟异种移植超急性排斥反应的抑制作用.方法 通过显微注射制备转人HT及DAF基因的子代小鼠,以聚合酶链反应和流式细胞仪筛选出人HT和(或)DAF基因整合与表达阳性的子代转基因小鼠.以同时表达人HT和DAF基因的小鼠为实验组,单一表达人HT或DAF基因的小鼠为HT对照组和DAF对照组,取其心脏,采用改良的Langendorff心脏灌注装置灌注心脏,先以KH液逆向灌注,30 min后再以含15%(体积分数)人AB血清的Krebs-Henseleit液(KH液)灌注.记录不同灌注时间的心率、左心室收缩压及左心室舒张末压,计算左心室获得压,以心率与左心室获得压的乘积作为心脏左心室收缩功能的指标,免疫组化法观察灌注后的心脏血管内皮细胞和组织中IgM与C3c的沉积情况.结果 KH液灌注过程中,各组间心脏做功能力的差异无统计学意义;KH液中加入人血清后,HT对照组和DAF对照组的心脏做功能力明显下降,在灌注60 min时心脏做功分别为最大值的27%和23%,平均做功时间分别为118 min和89 min,普通小鼠心脏在灌注后50 min时停止搏动,而实验组的心脏做功能力下降缓慢,至60 min时心脏做功维持在最大值的67%以上,平均做功时间为225 min,其心脏做功能力与搏动时间高于HT对照组和DAF对照组(P＜0.05).免疫组化染色显示,实验组小鼠心脏血管内皮细胞与组织中未见IgM和C3c沉积,HT对照组可见C3c少量沉积,DAF对照组可见IgM沉积和C3c少量沉积,普通小鼠心脏可见IgM和C3c沉积.结论 小鼠联合转移人HT和DAF基因后,其心脏在人血清灌注下的免疫损伤明显减轻,这可能对抵御异种移植超急性排斥反应有一定帮助.
目的 探討聯閤轉移人α1,2-巖藻糖苷轉移酶(HT)和衰變加速因子(DAF)基因對模擬異種移植超急性排斥反應的抑製作用.方法 通過顯微註射製備轉人HT及DAF基因的子代小鼠,以聚閤酶鏈反應和流式細胞儀篩選齣人HT和(或)DAF基因整閤與錶達暘性的子代轉基因小鼠.以同時錶達人HT和DAF基因的小鼠為實驗組,單一錶達人HT或DAF基因的小鼠為HT對照組和DAF對照組,取其心髒,採用改良的Langendorff心髒灌註裝置灌註心髒,先以KH液逆嚮灌註,30 min後再以含15%(體積分數)人AB血清的Krebs-Henseleit液(KH液)灌註.記錄不同灌註時間的心率、左心室收縮壓及左心室舒張末壓,計算左心室穫得壓,以心率與左心室穫得壓的乘積作為心髒左心室收縮功能的指標,免疫組化法觀察灌註後的心髒血管內皮細胞和組織中IgM與C3c的沉積情況.結果 KH液灌註過程中,各組間心髒做功能力的差異無統計學意義;KH液中加入人血清後,HT對照組和DAF對照組的心髒做功能力明顯下降,在灌註60 min時心髒做功分彆為最大值的27%和23%,平均做功時間分彆為118 min和89 min,普通小鼠心髒在灌註後50 min時停止搏動,而實驗組的心髒做功能力下降緩慢,至60 min時心髒做功維持在最大值的67%以上,平均做功時間為225 min,其心髒做功能力與搏動時間高于HT對照組和DAF對照組(P＜0.05).免疫組化染色顯示,實驗組小鼠心髒血管內皮細胞與組織中未見IgM和C3c沉積,HT對照組可見C3c少量沉積,DAF對照組可見IgM沉積和C3c少量沉積,普通小鼠心髒可見IgM和C3c沉積.結論 小鼠聯閤轉移人HT和DAF基因後,其心髒在人血清灌註下的免疫損傷明顯減輕,這可能對牴禦異種移植超急性排斥反應有一定幫助.
목적 탐토연합전이인α1,2-암조당감전이매(HT)화쇠변가속인자(DAF)기인대모의이충이식초급성배척반응적억제작용.방법 통과현미주사제비전인HT급DAF기인적자대소서,이취합매련반응화류식세포의사선출인HT화(혹)DAF기인정합여표체양성적자대전기인소서.이동시표체인HT화DAF기인적소서위실험조,단일표체인HT혹DAF기인적소서위HT대조조화DAF대조조,취기심장,채용개량적Langendorff심장관주장치관주심장,선이KH액역향관주,30 min후재이함15%(체적분수)인AB혈청적Krebs-Henseleit액(KH액)관주.기록불동관주시간적심솔、좌심실수축압급좌심실서장말압,계산좌심실획득압,이심솔여좌심실획득압적승적작위심장좌심실수축공능적지표,면역조화법관찰관주후적심장혈관내피세포화조직중IgM여C3c적침적정황.결과 KH액관주과정중,각조간심장주공능력적차이무통계학의의;KH액중가입인혈청후,HT대조조화DAF대조조적심장주공능력명현하강,재관주60 min시심장주공분별위최대치적27%화23%,평균주공시간분별위118 min화89 min,보통소서심장재관주후50 min시정지박동,이실험조적심장주공능력하강완만,지60 min시심장주공유지재최대치적67%이상,평균주공시간위225 min,기심장주공능력여박동시간고우HT대조조화DAF대조조(P＜0.05).면역조화염색현시,실험조소서심장혈관내피세포여조직중미견IgM화C3c침적,HT대조조가견C3c소량침적,DAF대조조가견IgM침적화C3c소량침적,보통소서심장가견IgM화C3c침적.결론 소서연합전이인HT화DAF기인후,기심장재인혈청관주하적면역손상명현감경,저가능대저어이충이식초급성배척반응유일정방조.
