全人源化抗结肠癌单链抗体基因的克隆和表达
전인원화항결장암단련항체기인적극륭화표체
Cloning and Expression of Human Anti-colonic Cancer Single-chain Fv Fragment
  • 万方数据
    生物工程学报 생물공정학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
    2001年 5期 526-530 ,共5页

    朱建高%李官成%李跃辉%胡锦跃%周国华%胡志伟%孙去病%李小玲

    주건고%리관성%리약휘%호금약%주국화%호지위%손거병%리소령

    大肠癌%噬菌体呈现%单链抗体%EBV转化%体外致敏%聚合酶链反应 大腸癌%噬菌體呈現%單鏈抗體%EBV轉化%體外緻敏%聚閤酶鏈反應
    대장암%서균체정현%단련항체%EBV전화%체외치민%취합매련반응
    分离大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC),在体外用灭活的大肠癌细胞再次致敏后,经EBV转化,然后用有限稀释法克隆分泌抗大肠癌细胞抗体的B细胞;多次PCR扩增和克隆其抗体可变区基因(VH/VLcDNA),并用编码(Gly4Ser)3的互补序列连接成ScFv cDNA(VH-linker-VL),经酶切克隆入载体fUSE 5 RF,使之呈现于噬菌体表面.通过用3轮肿瘤细胞和正常人PBMC淘选后,ELISA检测80%的单克隆噬菌体抗体显示了很强的阳性反应.以上结果初步说明:联合应用体外致敏、EBV转化、PCR扩增和噬菌体呈现技术制备高亲和力全人源化的抗肿瘤抗体是可行的.
    분리대장암환자외주혈단개핵세포(PBMC),재체외용멸활적대장암세포재차치민후,경EBV전화,연후용유한희석법극륭분비항대장암세포항체적B세포;다차PCR확증화극륭기항체가변구기인(VH/VLcDNA),병용편마(Gly4Ser)3적호보서렬련접성ScFv cDNA(VH-linker-VL),경매절극륭입재체fUSE 5 RF,사지정현우서균체표면.통과용3륜종류세포화정상인PBMC도선후,ELISA검측80%적단극륭서균체항체현시료흔강적양성반응.이상결과초보설명:연합응용체외치민、EBV전화、PCR확증화서균체정현기술제비고친화력전인원화적항종류항체시가행적.
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