武汉大学学报(理学版)
武漢大學學報(理學版)
무한대학학보(이학판)
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(Natural Science Edition)
2004年
6期
751-755
,共5页
沈晗%彭芳芳%张百芳%吴少波%李宪奎%杞少华%武栋成
瀋晗%彭芳芳%張百芳%吳少波%李憲奎%杞少華%武棟成
침함%팽방방%장백방%오소파%리헌규%기소화%무동성
绿色荧光蛋白%质粒%表达
綠色熒光蛋白%質粒%錶達
록색형광단백%질립%표체
构建第56位氨基酸发生突变的MEK1基因(MEK1/Q56P)与增强绿色荧光蛋白(EGFP)报道基因融合表达的真核重组质粒pEGFP-MEK1/Q56P,经限制性酶切及测序鉴定后,将其导入293T细胞中,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,同时进行Western blot检测.酶切鉴定及测序结果表明构建的pEGFP-MEK1/Q56P与预期结果一致,荧光观察及Western blot结果表明MEK1/Q56P和EGFP在293T细胞中能以融合蛋白的形式表达,且MEK1/Q56P能特异性活化ERK1/2.本研究成功构建了含有MEK1/Q56P的绿色荧光蛋白真核表达质粒,便于对Raf/MEK1/ERK1/2信号传导通路做进一步研究.
構建第56位氨基痠髮生突變的MEK1基因(MEK1/Q56P)與增彊綠色熒光蛋白(EGFP)報道基因融閤錶達的真覈重組質粒pEGFP-MEK1/Q56P,經限製性酶切及測序鑒定後,將其導入293T細胞中,用熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的錶達,同時進行Western blot檢測.酶切鑒定及測序結果錶明構建的pEGFP-MEK1/Q56P與預期結果一緻,熒光觀察及Western blot結果錶明MEK1/Q56P和EGFP在293T細胞中能以融閤蛋白的形式錶達,且MEK1/Q56P能特異性活化ERK1/2.本研究成功構建瞭含有MEK1/Q56P的綠色熒光蛋白真覈錶達質粒,便于對Raf/MEK1/ERK1/2信號傳導通路做進一步研究.
구건제56위안기산발생돌변적MEK1기인(MEK1/Q56P)여증강록색형광단백(EGFP)보도기인융합표체적진핵중조질립pEGFP-MEK1/Q56P,경한제성매절급측서감정후,장기도입293T세포중,용형광현미경관찰록색형광단백적표체,동시진행Western blot검측.매절감정급측서결과표명구건적pEGFP-MEK1/Q56P여예기결과일치,형광관찰급Western blot결과표명MEK1/Q56P화EGFP재293T세포중능이융합단백적형식표체,차MEK1/Q56P능특이성활화ERK1/2.본연구성공구건료함유MEK1/Q56P적록색형광단백진핵표체질립,편우대Raf/MEK1/ERK1/2신호전도통로주진일보연구.
