山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2005年
12期
1093-1099,1103
,共8页
宋绍霞%王志玉%毕振强%陶泽新%王志强%王宇露%宋艳艳%王桂亭
宋紹霞%王誌玉%畢振彊%陶澤新%王誌彊%王宇露%宋豔豔%王桂亭
송소하%왕지옥%필진강%도택신%왕지강%왕우로%송염염%왕계정
汉坦病毒%肾综合征出血热%M基因%核酸序列分析
漢坦病毒%腎綜閤徵齣血熱%M基因%覈痠序列分析
한탄병독%신종합정출혈열%M기인%핵산서렬분석
目的:建立汉坦病毒(HV)包膜糖蛋白M的克隆载体;研究M基因的变异情况,并对其序列进行系统发生树分析.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增GM04-38 M片段的基因,产物纯化后克隆于PMD-18T载体,经氨苄青霉素筛选,酶切鉴定,并进行序列测定,应用DNASTAR软件将它与世界范围内分离的病毒株同一基因序列分析比较.结果:筛选出含有HV M蛋白基因的克隆.GM04-38株M片段的全基因序列共3 651个核苷酸,4种核苷酸的比例分别为:A 30.46%,T 30.13%,G 20.84%,C 18.57%.序列同源分析表明,GM04-38株与Z37株核苷酸同源性最高(97.3%),属于SEO型HV.与其他SEO各株的差别均小于18.0%;绘出了核苷酸系统发生树.结论:成功地建立汉坦病毒M蛋白基因克隆载体;中国不同地区汉坦病毒流行株基因序列存在明显差异.这为研究HV遗传与变异以及制备有效的亚单位疫苗奠定了基础.
目的:建立漢坦病毒(HV)包膜糖蛋白M的剋隆載體;研究M基因的變異情況,併對其序列進行繫統髮生樹分析.方法:應用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)擴增GM04-38 M片段的基因,產物純化後剋隆于PMD-18T載體,經氨芐青黴素篩選,酶切鑒定,併進行序列測定,應用DNASTAR軟件將它與世界範圍內分離的病毒株同一基因序列分析比較.結果:篩選齣含有HV M蛋白基因的剋隆.GM04-38株M片段的全基因序列共3 651箇覈苷痠,4種覈苷痠的比例分彆為:A 30.46%,T 30.13%,G 20.84%,C 18.57%.序列同源分析錶明,GM04-38株與Z37株覈苷痠同源性最高(97.3%),屬于SEO型HV.與其他SEO各株的差彆均小于18.0%;繪齣瞭覈苷痠繫統髮生樹.結論:成功地建立漢坦病毒M蛋白基因剋隆載體;中國不同地區漢坦病毒流行株基因序列存在明顯差異.這為研究HV遺傳與變異以及製備有效的亞單位疫苗奠定瞭基礎.
목적:건립한탄병독(HV)포막당단백M적극륭재체;연구M기인적변이정황,병대기서렬진행계통발생수분석.방법:응용역전록취합매련반응(RT-PCR)확증GM04-38 M편단적기인,산물순화후극륭우PMD-18T재체,경안변청매소사선,매절감정,병진행서렬측정,응용DNASTAR연건장타여세계범위내분리적병독주동일기인서렬분석비교.결과:사선출함유HV M단백기인적극륭.GM04-38주M편단적전기인서렬공3 651개핵감산,4충핵감산적비례분별위:A 30.46%,T 30.13%,G 20.84%,C 18.57%.서렬동원분석표명,GM04-38주여Z37주핵감산동원성최고(97.3%),속우SEO형HV.여기타SEO각주적차별균소우18.0%;회출료핵감산계통발생수.결론:성공지건립한탄병독M단백기인극륭재체;중국불동지구한탄병독류행주기인서렬존재명현차이.저위연구HV유전여변이이급제비유효적아단위역묘전정료기출.
