生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
2期
262-267
,共6页
孔丽君%敖强%奚静%张玲%公衍道%赵南明%张秀芳
孔麗君%敖彊%奚靜%張玲%公衍道%趙南明%張秀芳
공려군%오강%해정%장령%공연도%조남명%장수방
组织工程%分化%纳米羟基磷灰石%壳聚糖%生物相容性
組織工程%分化%納米羥基燐灰石%殼聚糖%生物相容性
조직공정%분화%납미간기린회석%각취당%생물상용성
用原位合成纳米羟基磷灰石的方法制备多孔纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架;在支架上接种MC 3T3-E1细胞,瑞氏染色检测细胞形态,MTT法检测其增殖情况;在诱导培养基中培养30d后,碱性磷酸酶染色比较其分化水平;定量检测细胞的碱性磷酸酶活性;RT-PCR检测成骨相关基因的表达情况.实验结果表明:MC 3T3-E1细胞在纳米级羟基磷灰石/壳聚糖复合支架上粘附铺展良好,其增殖率显著高于培养于纯壳聚糖支架上的细胞.碱性磷酸酶染色表明复合支架上的细胞有较高水平的碱性磷酸酶表达.进一步定量检测细胞的碱性磷酸酶活性,结果说明在复合支架上细胞比纯壳聚糖支架上培养的细胞碱性磷酸酶活性提高了约8倍.此外,骨分化相关特征基因骨桥蛋白OPN在复合支架上培养的细胞中的表达水平也明显高于纯壳聚糖上培养的细胞.分化成熟标志基因骨钙素OC在复合支架上培养的细胞中有表达,但是纯壳聚糖支架上培养的细胞中却未检测到.支架中纳米羟基磷灰石的加入不仅提高了前成骨细胞在复合支架上的增殖,而且还促进了它的分化.纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架表现出良好的生物相容性和生物活性,是极具前景的骨组织工程支架材料.
用原位閤成納米羥基燐灰石的方法製備多孔納米羥基燐灰石/殼聚糖複閤支架;在支架上接種MC 3T3-E1細胞,瑞氏染色檢測細胞形態,MTT法檢測其增殖情況;在誘導培養基中培養30d後,堿性燐痠酶染色比較其分化水平;定量檢測細胞的堿性燐痠酶活性;RT-PCR檢測成骨相關基因的錶達情況.實驗結果錶明:MC 3T3-E1細胞在納米級羥基燐灰石/殼聚糖複閤支架上粘附鋪展良好,其增殖率顯著高于培養于純殼聚糖支架上的細胞.堿性燐痠酶染色錶明複閤支架上的細胞有較高水平的堿性燐痠酶錶達.進一步定量檢測細胞的堿性燐痠酶活性,結果說明在複閤支架上細胞比純殼聚糖支架上培養的細胞堿性燐痠酶活性提高瞭約8倍.此外,骨分化相關特徵基因骨橋蛋白OPN在複閤支架上培養的細胞中的錶達水平也明顯高于純殼聚糖上培養的細胞.分化成熟標誌基因骨鈣素OC在複閤支架上培養的細胞中有錶達,但是純殼聚糖支架上培養的細胞中卻未檢測到.支架中納米羥基燐灰石的加入不僅提高瞭前成骨細胞在複閤支架上的增殖,而且還促進瞭它的分化.納米羥基燐灰石/殼聚糖複閤支架錶現齣良好的生物相容性和生物活性,是極具前景的骨組織工程支架材料.
용원위합성납미간기린회석적방법제비다공납미간기린회석/각취당복합지가;재지가상접충MC 3T3-E1세포,서씨염색검측세포형태,MTT법검측기증식정황;재유도배양기중배양30d후,감성린산매염색비교기분화수평;정량검측세포적감성린산매활성;RT-PCR검측성골상관기인적표체정황.실험결과표명:MC 3T3-E1세포재납미급간기린회석/각취당복합지가상점부포전량호,기증식솔현저고우배양우순각취당지가상적세포.감성린산매염색표명복합지가상적세포유교고수평적감성린산매표체.진일보정량검측세포적감성린산매활성,결과설명재복합지가상세포비순각취당지가상배양적세포감성린산매활성제고료약8배.차외,골분화상관특정기인골교단백OPN재복합지가상배양적세포중적표체수평야명현고우순각취당상배양적세포.분화성숙표지기인골개소OC재복합지가상배양적세포중유표체,단시순각취당지가상배양적세포중각미검측도.지가중납미간기린회석적가입불부제고료전성골세포재복합지가상적증식,이차환촉진료타적분화.납미간기린회석/각취당복합지가표현출량호적생물상용성화생물활성,시겁구전경적골조직공정지가재료.
