中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
25期
4887-4890
,共4页
林远方%辛本忠%卿茂盛%萧劲夫%陈伟梅
林遠方%辛本忠%卿茂盛%蕭勁伕%陳偉梅
림원방%신본충%경무성%소경부%진위매
白细胞介素6/界膜%人工关节%健骨二仙丸%中医中药
白細胞介素6/界膜%人工關節%健骨二仙汍%中醫中藥
백세포개소6/계막%인공관절%건골이선환%중의중약
目的:观察中药健骨二仙丸对体外培养人工关节假体周围界膜白细胞介素6表达的抑制作用,为健骨二仙丸防治人工关节假体周围骨溶解提供科学依据.方法:实验于2006-09/12在深圳市中医院中心实验室(国家级P2实验室)完成.①体外界膜组织培养:将备用的人工关节假体周围界膜(20 g,取自右股骨颈骨折人工关节置换术后11年出现假体无菌性松动来深圳市中医院行翻修术患者,女性,74岁,对实验知情同意并经医院伦理委员会批准)放入Hank's液中清洗后置于RPMI培养液中,然后将界膜标本用眼科剪剪成1 mm3大小组织悬浮液.②含药血清制备:按每日中药健骨二仙丸生药12.0 g/kg大鼠体质量灌胃(相当于临床剂量的6.25倍),每日固邦用量为1.04 mg/kg体质量(相当于临床剂量的6-25倍).2次/d,间隔5 h,连续灌胃3 d.末次灌药1 h后,从腹主动脉取血,离心获取血清.③分组:取24孔培养板2块,分空白对照组、健骨二仙丸组、固邦组,各组又分别分100 g/L,200 g/L两个质量浓度亚组,共计6个组,每组8个培养孔.100 g/L质量浓度组相应加入0.9 mL组织悬液和0.1 mL空白血清或健骨二仙丸、固邦含药血清.200 g/L质量浓度组相应加入0.8 mL组织悬液和0.2 mL空白血清或健骨二仙丸、固邦含药血清.④实验评估:各组添加空白血清或含药血清后在体积分数为0.05 CO2、37℃饱和湿度下培养72 h,取上清液,用酶联免疫吸附法测定白细胞介素6的含量.上述界膜组织标本同时做细菌培养.结果:48个培养孔中的组织培养均成功,全部进入结果分析.①白细胞介素6水平:100 g/L与200 g/L空白对照组比较差异无显著意义[(97.113±11.989),(96.275±13.087)ng/L,p＞0.05].100 g/L健骨二仙丸组[(92.288±10.397)ng/L]与空白对照组相比差异无显著性(P＞0.05);200 g/L健骨二仙丸组[(82.263±9.580)ng/L]低于空白对照各组(P＜0.05).100 g/L与200 g/L固邦组[(83.300±9.039),(79.338±11.118)ng/L]低于空白对照各组(p＜0.05和P＜0.01).200 g/L健骨二仙丸组与100 g/L和200 g/L固邦组比较,差异无显著性.②人工关节周围界膜组织细菌培养结果为阴性.结论:健骨二仙丸能够抑制磨损颗粒诱导的人工关节假体周围界膜细胞因子的分泌,进而阻止假体周围破骨细胞性骨溶解,对人工关节假体无菌性松动可能具有较好的防治作用.
目的:觀察中藥健骨二仙汍對體外培養人工關節假體週圍界膜白細胞介素6錶達的抑製作用,為健骨二仙汍防治人工關節假體週圍骨溶解提供科學依據.方法:實驗于2006-09/12在深圳市中醫院中心實驗室(國傢級P2實驗室)完成.①體外界膜組織培養:將備用的人工關節假體週圍界膜(20 g,取自右股骨頸骨摺人工關節置換術後11年齣現假體無菌性鬆動來深圳市中醫院行翻脩術患者,女性,74歲,對實驗知情同意併經醫院倫理委員會批準)放入Hank's液中清洗後置于RPMI培養液中,然後將界膜標本用眼科剪剪成1 mm3大小組織懸浮液.②含藥血清製備:按每日中藥健骨二仙汍生藥12.0 g/kg大鼠體質量灌胃(相噹于臨床劑量的6.25倍),每日固邦用量為1.04 mg/kg體質量(相噹于臨床劑量的6-25倍).2次/d,間隔5 h,連續灌胃3 d.末次灌藥1 h後,從腹主動脈取血,離心穫取血清.③分組:取24孔培養闆2塊,分空白對照組、健骨二仙汍組、固邦組,各組又分彆分100 g/L,200 g/L兩箇質量濃度亞組,共計6箇組,每組8箇培養孔.100 g/L質量濃度組相應加入0.9 mL組織懸液和0.1 mL空白血清或健骨二仙汍、固邦含藥血清.200 g/L質量濃度組相應加入0.8 mL組織懸液和0.2 mL空白血清或健骨二仙汍、固邦含藥血清.④實驗評估:各組添加空白血清或含藥血清後在體積分數為0.05 CO2、37℃飽和濕度下培養72 h,取上清液,用酶聯免疫吸附法測定白細胞介素6的含量.上述界膜組織標本同時做細菌培養.結果:48箇培養孔中的組織培養均成功,全部進入結果分析.①白細胞介素6水平:100 g/L與200 g/L空白對照組比較差異無顯著意義[(97.113±11.989),(96.275±13.087)ng/L,p＞0.05].100 g/L健骨二仙汍組[(92.288±10.397)ng/L]與空白對照組相比差異無顯著性(P＞0.05);200 g/L健骨二仙汍組[(82.263±9.580)ng/L]低于空白對照各組(P＜0.05).100 g/L與200 g/L固邦組[(83.300±9.039),(79.338±11.118)ng/L]低于空白對照各組(p＜0.05和P＜0.01).200 g/L健骨二仙汍組與100 g/L和200 g/L固邦組比較,差異無顯著性.②人工關節週圍界膜組織細菌培養結果為陰性.結論:健骨二仙汍能夠抑製磨損顆粒誘導的人工關節假體週圍界膜細胞因子的分泌,進而阻止假體週圍破骨細胞性骨溶解,對人工關節假體無菌性鬆動可能具有較好的防治作用.
목적:관찰중약건골이선환대체외배양인공관절가체주위계막백세포개소6표체적억제작용,위건골이선환방치인공관절가체주위골용해제공과학의거.방법:실험우2006-09/12재심수시중의원중심실험실(국가급P2실험실)완성.①체외계막조직배양:장비용적인공관절가체주위계막(20 g,취자우고골경골절인공관절치환술후11년출현가체무균성송동래심수시중의원행번수술환자,녀성,74세,대실험지정동의병경의원윤리위원회비준)방입Hank's액중청세후치우RPMI배양액중,연후장계막표본용안과전전성1 mm3대소조직현부액.②함약혈청제비:안매일중약건골이선환생약12.0 g/kg대서체질량관위(상당우림상제량적6.25배),매일고방용량위1.04 mg/kg체질량(상당우림상제량적6-25배).2차/d,간격5 h,련속관위3 d.말차관약1 h후,종복주동맥취혈,리심획취혈청.③분조:취24공배양판2괴,분공백대조조、건골이선환조、고방조,각조우분별분100 g/L,200 g/L량개질량농도아조,공계6개조,매조8개배양공.100 g/L질량농도조상응가입0.9 mL조직현액화0.1 mL공백혈청혹건골이선환、고방함약혈청.200 g/L질량농도조상응가입0.8 mL조직현액화0.2 mL공백혈청혹건골이선환、고방함약혈청.④실험평고:각조첨가공백혈청혹함약혈청후재체적분수위0.05 CO2、37℃포화습도하배양72 h,취상청액,용매련면역흡부법측정백세포개소6적함량.상술계막조직표본동시주세균배양.결과:48개배양공중적조직배양균성공,전부진입결과분석.①백세포개소6수평:100 g/L여200 g/L공백대조조비교차이무현저의의[(97.113±11.989),(96.275±13.087)ng/L,p＞0.05].100 g/L건골이선환조[(92.288±10.397)ng/L]여공백대조조상비차이무현저성(P＞0.05);200 g/L건골이선환조[(82.263±9.580)ng/L]저우공백대조각조(P＜0.05).100 g/L여200 g/L고방조[(83.300±9.039),(79.338±11.118)ng/L]저우공백대조각조(p＜0.05화P＜0.01).200 g/L건골이선환조여100 g/L화200 g/L고방조비교,차이무현저성.②인공관절주위계막조직세균배양결과위음성.결론:건골이선환능구억제마손과립유도적인공관절가체주위계막세포인자적분비,진이조지가체주위파골세포성골용해,대인공관절가체무균성송동가능구유교호적방치작용.
