CAJ | 학술논문

[目的]制备TRE-HCV-C转基因小鼠,为四环素调控系统的体内研究提供了反应部分的转基因小鼠,以便与本实验室同时建立的调控部分的小鼠共同作用,为进一步建立双转基因小鼠模型奠定基础,更为丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)的发病机制的研究提供一个实用方便的模型.[方法]重组构建含有目的基因HCV-C、TRE序列和SV40 polyA的转基因载体pTRE-HCV-C,以显微注射的方法将1.153 kb的转基因片段注入BALB/C母鼠的受精卵,出生动物及其后代经PCR初步筛选出阳性,再经Southern杂交对阳性鼠基因组DNA标本行进一步鉴定.用转基因阳性小鼠和整合有肝脏特异性启动子ApoE和rtTA基因的另一品系转基因小鼠杂交,得到子代F1小鼠,通过免疫组织化学来初步检测HCV-C在肝脏中特异性的可调控性的表达.[结果]产生了5只整合有TRE-HCV-C基因的首建鼠,以及它的子代也带有此基因.与基因组上整合有肝脏特异性启动子ApoE和rtTA基因的转基因小鼠杂交后,得到子代F1小鼠,特定时间与DOX作用后,小鼠肝脏的免疫组织化学结果表明,TRE-HCV-C小鼠为丙型肝炎病毒核心蛋白的发病机制研究提供了一个良好的动物模型工具.[结论]成功制备了HCV-C转基因小鼠,可利用四环素调控系统来研究HCV中的C基因对小鼠的作用,为进一步建立四环素调控系统调控下表达HCV-C基因双转基因小鼠模型奠定基础,也是HCV-C基因功能研究及与肝细胞癌的关系的机制研究的一个有用工具.
[목적]제비TRE-HCV-C전기인소서,위사배소조공계통적체내연구제공료반응부분적전기인소서,이편여본실험실동시건립적조공부분적소서공동작용,위진일보건립쌍전기인소서모형전정기출,경위병형간염병독핵심단백(HCV-C)적발병궤제적연구제공일개실용방편적모형.[방법]중조구건함유목적기인HCV-C、TRE서렬화SV40 polyA적전기인재체pTRE-HCV-C,이현미주사적방법장1.153 kb적전기인편단주입BALB/C모서적수정란,출생동물급기후대경PCR초보사선출양성,재경Southern잡교대양성서기인조DNA표본행진일보감정.용전기인양성소서화정합유간장특이성계동자ApoE화rtTA기인적령일품계전기인소서잡교,득도자대F1소서,통과면역조직화학래초보검측HCV-C재간장중특이성적가조공성적표체.[결과]산생료5지정합유TRE-HCV-C기인적수건서,이급타적자대야대유차기인.여기인조상정합유간장특이성계동자ApoE화rtTA기인적전기인소서잡교후,득도자대F1소서,특정시간여DOX작용후,소서간장적면역조직화학결과표명,TRE-HCV-C소서위병형간염병독핵심단백적발병궤제연구제공료일개량호적동물모형공구.[결론]성공제비료HCV-C전기인소서,가이용사배소조공계통래연구HCV중적C기인대소서적작용,위진일보건립사배소조공계통조공하표체HCV-C기인쌍전기인소서모형전정기출,야시HCV-C기인공능연구급여간세포암적관계적궤제연구적일개유용공구.