CAJ | 학술논문

背景:胆汁淤积是肝移植后的常见并发症之一,严重胆汁淤积可能伴随着不可逆性的肝功能损害.肝移植后早期应用重组人生长激素,能促进移植肝功能的恢复.目的:拟验证重组人生长激素对大鼠肝移植后胆汁淤积的调节作用.设计、时间及地点:细胞分子水平的随机对照动物实验,于2005-12/2006-12在东方肝胆外科医院及解放军第二军医大学动物实验中心完成.材料:选用Wistar大鼠105只,按随机数字表法分为3组,假手术组21只;其余大鼠配对建立大鼠肝移植模型后,分为生长激素组和肝移植组(n=21).方法:生长激素组大鼠肝移植后即予皮下注射重组人生长激素2U/(kg·d)至处死日;其他组同时皮下注射等量生理盐水.假手术组仅做开腹和关腹,游离肝脏并不行肝移植.主要观察指标:各组分别于移植后1,3,7 d处死取材(n=7),采集血清样本检测碱性磷酸酶、谷氨酰转肽酶、谷丙转氨酶活性及总胆汁酸、总胆红素含量等肝功能指标;应用放射免疫法检测生长激素:取肝组织样本,应用免疫组织化学和聚合酶链反应方法分析毛细胆管膜面上多耐药相关蛋白2和胆盐输出泵表达水平,并对以上指标进行相关性分析.结果:[1]肝移植组人鼠在移植后早期出现胆汁淤积,移植后1,3 d的各项肝功能指标均高于假手术组(p<0.05),术后7 d呈下降趋势.[2]生长激素组与肝移植组同期比较,胆汁淤积程度降低,恢复迅速.[3]肝移植组肝脏多耐药相关蛋白2在毛细胆管膜上定位减少、向胞浆内分布,表达亦明显下调;生长激素组大鼠的肝脏多耐约相关蛋白2表达水平明显增高,恢复加快.[4]胆盐输出泵的表达在各组问差异无显著性意义(P>0.05).[5]肝组织多药耐药相关蛋白2表达与血清生长激素呈正相关(r=0.8592,P<0.05);与血清胆红素呈负相关(r=0.777 2,P<0.05).结论:多耐约相关蛋白2的表达减少以及定位异常可能是肝移植后胆汁淤积发生的主要分子途径之一,重组人生长激素促进胆红素的转运可能是通过直接上调多耐药相关蛋白2表达来实现,胆盐输出泵不参与肝移植后早期胆汁淤积. 揹景:膽汁淤積是肝移植後的常見併髮癥之一,嚴重膽汁淤積可能伴隨著不可逆性的肝功能損害.肝移植後早期應用重組人生長激素,能促進移植肝功能的恢複.目的:擬驗證重組人生長激素對大鼠肝移植後膽汁淤積的調節作用.設計、時間及地點:細胞分子水平的隨機對照動物實驗,于2005-12/2006-12在東方肝膽外科醫院及解放軍第二軍醫大學動物實驗中心完成.材料:選用Wistar大鼠105隻,按隨機數字錶法分為3組,假手術組21隻;其餘大鼠配對建立大鼠肝移植模型後,分為生長激素組和肝移植組(n=21).方法:生長激素組大鼠肝移植後即予皮下註射重組人生長激素2U/(kg·d)至處死日;其他組同時皮下註射等量生理鹽水.假手術組僅做開腹和關腹,遊離肝髒併不行肝移植.主要觀察指標:各組分彆于移植後1,3,7 d處死取材(n=7),採集血清樣本檢測堿性燐痠酶、穀氨酰轉肽酶、穀丙轉氨酶活性及總膽汁痠、總膽紅素含量等肝功能指標;應用放射免疫法檢測生長激素:取肝組織樣本,應用免疫組織化學和聚閤酶鏈反應方法分析毛細膽管膜麵上多耐藥相關蛋白2和膽鹽輸齣泵錶達水平,併對以上指標進行相關性分析.結果:[1]肝移植組人鼠在移植後早期齣現膽汁淤積,移植後1,3 d的各項肝功能指標均高于假手術組(p<0.05),術後7 d呈下降趨勢.[2]生長激素組與肝移植組同期比較,膽汁淤積程度降低,恢複迅速.[3]肝移植組肝髒多耐藥相關蛋白2在毛細膽管膜上定位減少、嚮胞漿內分佈,錶達亦明顯下調;生長激素組大鼠的肝髒多耐約相關蛋白2錶達水平明顯增高,恢複加快.[4]膽鹽輸齣泵的錶達在各組問差異無顯著性意義(P>0.05).[5]肝組織多藥耐藥相關蛋白2錶達與血清生長激素呈正相關(r=0.8592,P<0.05);與血清膽紅素呈負相關(r=0.777 2,P<0.05).結論:多耐約相關蛋白2的錶達減少以及定位異常可能是肝移植後膽汁淤積髮生的主要分子途徑之一,重組人生長激素促進膽紅素的轉運可能是通過直接上調多耐藥相關蛋白2錶達來實現,膽鹽輸齣泵不參與肝移植後早期膽汁淤積.
배경:담즙어적시간이식후적상견병발증지일,엄중담즙어적가능반수착불가역성적간공능손해.간이식후조기응용중조인생장격소,능촉진이식간공능적회복.목적:의험증중조인생장격소대대서간이식후담즙어적적조절작용.설계、시간급지점:세포분자수평적수궤대조동물실험,우2005-12/2006-12재동방간담외과의원급해방군제이군의대학동물실험중심완성.재료:선용Wistar대서105지,안수궤수자표법분위3조,가수술조21지;기여대서배대건립대서간이식모형후,분위생장격소조화간이식조(n=21).방법:생장격소조대서간이식후즉여피하주사중조인생장격소2U/(kg·d)지처사일;기타조동시피하주사등량생리염수.가수술조부주개복화관복,유리간장병불행간이식.주요관찰지표:각조분별우이식후1,3,7 d처사취재(n=7),채집혈청양본검측감성린산매、곡안선전태매、곡병전안매활성급총담즙산、총담홍소함량등간공능지표;응용방사면역법검측생장격소:취간조직양본,응용면역조직화학화취합매련반응방법분석모세담관막면상다내약상관단백2화담염수출빙표체수평,병대이상지표진행상관성분석.결과:[1]간이식조인서재이식후조기출현담즙어적,이식후1,3 d적각항간공능지표균고우가수술조(p<0.05),술후7 d정하강추세.[2]생장격소조여간이식조동기비교,담즙어적정도강저,회복신속.[3]간이식조간장다내약상관단백2재모세담관막상정위감소、향포장내분포,표체역명현하조;생장격소조대서적간장다내약상관단백2표체수평명현증고,회복가쾌.[4]담염수출빙적표체재각조문차이무현저성의의(P>0.05).[5]간조직다약내약상관단백2표체여혈청생장격소정정상관(r=0.8592,P<0.05);여혈청담홍소정부상관(r=0.777 2,P<0.05).결론:다내약상관단백2적표체감소이급정위이상가능시간이식후담즙어적발생적주요분자도경지일,중조인생장격소촉진담홍소적전운가능시통과직접상조다내약상관단백2표체래실현,담염수출빙불삼여간이식후조기담즙어적.