西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
9期
5-10
,共6页
李艳梅%贾康胜%杨鸣琦%徐秀容
李豔梅%賈康勝%楊鳴琦%徐秀容
리염매%가강성%양명기%서수용
鹿茸%GHR%基因克隆%原位杂交
鹿茸%GHR%基因剋隆%原位雜交
록용%GHR%기인극륭%원위잡교
[目的]检测鹿茸顶端组织GHR基因的表达,为鹿茸再生的分子机理研究提供理论依据.[方法]根据GenBank已发表的牛、山羊和绵羊生长激素受体(GHR)基因序列,用CLUSTAL W软件进行同源性分析,在保守序列设计克隆鹿GHR基因编码序列的引物.以3～4岁健康鹿生长30 d的鹿茸顶端组织提取的总RNA为模板,利用RT-PCR技术克隆GHR基因的cDNA序列;并用原位杂交技术对GHR基因在鹿茸顶端进行组织定位.[结果]成功克隆到了1 967 bp的序列(GenBank登陆号为EU381142),该序列包含GHR基因的全部编码序列.鹿GHR基因与牛、羊、人GHR核苷酸同源性分别为97%,97%和80%,GHR蛋白氨基酸序列同源性分别为97.9%,97.6%和77.3%.杂交结果显示,在皮肤层、间叶细胞层、软骨膜层和软骨层的阳性组均有蓝色杂交信号.[结论]利用RT-PCR技术和原位杂交技术在鹿茸顶端皮肤层、间叶细胞层、软骨膜层和软骨层均检测到GHR的表达.
[目的]檢測鹿茸頂耑組織GHR基因的錶達,為鹿茸再生的分子機理研究提供理論依據.[方法]根據GenBank已髮錶的牛、山羊和綿羊生長激素受體(GHR)基因序列,用CLUSTAL W軟件進行同源性分析,在保守序列設計剋隆鹿GHR基因編碼序列的引物.以3～4歲健康鹿生長30 d的鹿茸頂耑組織提取的總RNA為模闆,利用RT-PCR技術剋隆GHR基因的cDNA序列;併用原位雜交技術對GHR基因在鹿茸頂耑進行組織定位.[結果]成功剋隆到瞭1 967 bp的序列(GenBank登陸號為EU381142),該序列包含GHR基因的全部編碼序列.鹿GHR基因與牛、羊、人GHR覈苷痠同源性分彆為97%,97%和80%,GHR蛋白氨基痠序列同源性分彆為97.9%,97.6%和77.3%.雜交結果顯示,在皮膚層、間葉細胞層、軟骨膜層和軟骨層的暘性組均有藍色雜交信號.[結論]利用RT-PCR技術和原位雜交技術在鹿茸頂耑皮膚層、間葉細胞層、軟骨膜層和軟骨層均檢測到GHR的錶達.
[목적]검측록용정단조직GHR기인적표체,위록용재생적분자궤리연구제공이론의거.[방법]근거GenBank이발표적우、산양화면양생장격소수체(GHR)기인서렬,용CLUSTAL W연건진행동원성분석,재보수서렬설계극륭록GHR기인편마서렬적인물.이3～4세건강록생장30 d적록용정단조직제취적총RNA위모판,이용RT-PCR기술극륭GHR기인적cDNA서렬;병용원위잡교기술대GHR기인재록용정단진행조직정위.[결과]성공극륭도료1 967 bp적서렬(GenBank등륙호위EU381142),해서렬포함GHR기인적전부편마서렬.록GHR기인여우、양、인GHR핵감산동원성분별위97%,97%화80%,GHR단백안기산서렬동원성분별위97.9%,97.6%화77.3%.잡교결과현시,재피부층、간협세포층、연골막층화연골층적양성조균유람색잡교신호.[결론]이용RT-PCR기술화원위잡교기술재록용정단피부층、간협세포층、연골막층화연골층균검측도GHR적표체.
