农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2008年
6期
931-935
,共5页
吴凌娟%仲飞%解民%靳慧君%王微%韩冬梅
吳凌娟%仲飛%解民%靳慧君%王微%韓鼕梅
오릉연%중비%해민%근혜군%왕미%한동매
绿脓杆菌%PEA%克隆%序列分析%真核表达
綠膿桿菌%PEA%剋隆%序列分析%真覈錶達
록농간균%PEA%극륭%서렬분석%진핵표체
采用PCR方法从绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)ATCC27853菌株基因组扩增绿脓杆菌外毒素A(Pseudomonas aeruginosa exotoxinA,PEA)全长编码基因,并将PEA基因插入到pcDNA3.1A真核表达载体中,构建成pcDNA3.1/PEA质粒表达载体.经磷酸钙介导将重组质粒转染HEK293T细胞进行表达.结果表明,克隆的PEA基因与标准菌株PA103相比,碱基序列、氨基酸序列同源性均达99%.表达产物经Western blot检测,表明含有原基因信号肽的PEA基因能够在真核细胞进行分泌性表达.
採用PCR方法從綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)ATCC27853菌株基因組擴增綠膿桿菌外毒素A(Pseudomonas aeruginosa exotoxinA,PEA)全長編碼基因,併將PEA基因插入到pcDNA3.1A真覈錶達載體中,構建成pcDNA3.1/PEA質粒錶達載體.經燐痠鈣介導將重組質粒轉染HEK293T細胞進行錶達.結果錶明,剋隆的PEA基因與標準菌株PA103相比,堿基序列、氨基痠序列同源性均達99%.錶達產物經Western blot檢測,錶明含有原基因信號肽的PEA基因能夠在真覈細胞進行分泌性錶達.
채용PCR방법종록농간균(Pseudomonas aeruginosa)ATCC27853균주기인조확증록농간균외독소A(Pseudomonas aeruginosa exotoxinA,PEA)전장편마기인,병장PEA기인삽입도pcDNA3.1A진핵표체재체중,구건성pcDNA3.1/PEA질립표체재체.경린산개개도장중조질립전염HEK293T세포진행표체.결과표명,극륭적PEA기인여표준균주PA103상비,감기서렬、안기산서렬동원성균체99%.표체산물경Western blot검측,표명함유원기인신호태적PEA기인능구재진핵세포진행분비성표체.
