中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2009年
13期
241-245
,共5页
于飞%冯素萍%童和林%武耀廷
于飛%馮素萍%童和林%武耀廷
우비%풍소평%동화림%무요정
橡胶树%SAM-SSR%优化
橡膠樹%SAM-SSR%優化
상효수%SAM-SSR%우화
以橡胶树品种热研88-13为试材,研究了橡胶树SAM.SSR法中各个过程(酶切、连接、抑制性和预扩增)中各因素对SAM法结果的影响.实验结果表明:5UMse I和5U Pst I双酶切1 h为最合适酶切浓度、方式和时间:100～300 ng为适宜的DNA模板浓度;合适的连接温度和时间为16℃连接过夜;连接产物和抑制性PCR产物分别稀释20倍,为抑制性PCR和预扩增PCR的适宜模板浓度.SAM扩增产物用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶检测,结果显示,扩增条带分布在200～750 bp之间,能够满足建立橡胶树SSR基因组文库的需要.
以橡膠樹品種熱研88-13為試材,研究瞭橡膠樹SAM.SSR法中各箇過程(酶切、連接、抑製性和預擴增)中各因素對SAM法結果的影響.實驗結果錶明:5UMse I和5U Pst I雙酶切1 h為最閤適酶切濃度、方式和時間:100～300 ng為適宜的DNA模闆濃度;閤適的連接溫度和時間為16℃連接過夜;連接產物和抑製性PCR產物分彆稀釋20倍,為抑製性PCR和預擴增PCR的適宜模闆濃度.SAM擴增產物用8%的非變性聚丙烯酰胺凝膠檢測,結果顯示,擴增條帶分佈在200～750 bp之間,能夠滿足建立橡膠樹SSR基因組文庫的需要.
이상효수품충열연88-13위시재,연구료상효수SAM.SSR법중각개과정(매절、련접、억제성화예확증)중각인소대SAM법결과적영향.실험결과표명:5UMse I화5U Pst I쌍매절1 h위최합괄매절농도、방식화시간:100～300 ng위괄의적DNA모판농도;합괄적련접온도화시간위16℃련접과야;련접산물화억제성PCR산물분별희석20배,위억제성PCR화예확증PCR적괄의모판농도.SAM확증산물용8%적비변성취병희선알응효검측,결과현시,확증조대분포재200～750 bp지간,능구만족건립상효수SSR기인조문고적수요.
