CAJ | 학술논문

目的:通过构建人同源基因E2F-1反转录病毒表达载体,观察E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803增殖的影响.方法:应用基因重组技术将E2F-1基因克隆到反转录病毒载体pLXSN中,并将经酶切和RT-PCR检测正确的重组载体转染PA317包装细胞,收集病毒上清液感染胃癌细胞MGC-803.应用 RT-PCR和Western印迹法检测MGC-803/pLXSN-E2F-1细胞中E2F-1 mRNA和蛋白的表达情况.应用克隆形成实验和MTT法检测细胞的增殖情况.结果:经酶切和RT-PCR检测结果显示,成功构建E2F-1反转录病毒表达载体.与MGC-803和MGC-803/pLXSN组相比, MGC-803/pLXSN-E2F-1组E2F-1 mRNA和蛋白的表达明显上调(P<0.05).MGC-803/pLXSN-E2F-1组的克隆形成率为48%,明显低于MGC-803组的81%和MGC-803/pLXSN组的77%,差异有统计学意义(P<0.01).MGC-803/pLXSN-E2F-1组的细胞增殖率明显慢于MGC-803组和MGC-803/pLXSN组(P<0.01).结论:成功构建了E2F-1基因过表达的反转录病毒表达载体,并将其成功感染MGC-803细胞,E2F-1过表达可抑制MGC-803细胞的增殖.
목적:통과구건인동원기인E2F-1반전록병독표체재체,관찰E2F-1과표체대위암세포MGC-803증식적영향.방법:응용기인중조기술장E2F-1기인극륭도반전록병독재체pLXSN중,병장경매절화RT-PCR검측정학적중조재체전염PA317포장세포,수집병독상청액감염위암세포MGC-803.응용 RT-PCR화Western인적법검측MGC-803/pLXSN-E2F-1세포중E2F-1 mRNA화단백적표체정황.응용극륭형성실험화MTT법검측세포적증식정황.결과:경매절화RT-PCR검측결과현시,성공구건E2F-1반전록병독표체재체.여MGC-803화MGC-803/pLXSN조상비, MGC-803/pLXSN-E2F-1조E2F-1 mRNA화단백적표체명현상조(P<0.05).MGC-803/pLXSN-E2F-1조적극륭형성솔위48%,명현저우MGC-803조적81%화MGC-803/pLXSN조적77%,차이유통계학의의(P<0.01).MGC-803/pLXSN-E2F-1조적세포증식솔명현만우MGC-803조화MGC-803/pLXSN조(P<0.01).결론:성공구건료E2F-1기인과표체적반전록병독표체재체,병장기성공감염MGC-803세포,E2F-1과표체가억제MGC-803세포적증식.