CAJ | 학술논문

Jagged-1蛋白属于Noah信号通路的配体之一,而Notch信号通路是介导细胞和细胞之间接触的主要信号通路之一,在造血微环境中调节造血细胞增殖与分化的过程中起重要作用.为研究Notch信号通路中受体与配体结合后的生物学功能及Notch信号通路在骨髓基质细胞影响细胞耐药的作用机制,构建过表达Jagged-1蛋白的NIH-3T3细胞株.构建含Jagged-1全编码区基因的pEGFP-IRES2-Jagged-1真核表达载体.结果表明,重组质粒转染哺乳动物细胞NIH-3T3后,Western blot分析证实转染后NIH-3T3细胞高效表达Jagged-1蛋白;经过选择性培养基筛选及有限稀释法挑取单克隆细胞后,流式细胞术(FCM)分析证实建立起过表达Jagged-1蛋白的单克隆细胞模型,即NIH-3T3-pEGFP-IRES2-Jagged-1细胞株.结论:本研究成功构建了Jagged-1真核表达栽体,并建立了稳定转染的单克隆细胞株.过表达Jagged-1蛋白的NIH-3T3单克隆细胞株的构建为我们研究骨髓基质细胞相关的细胞耐药的作用机制并为发现新的药物作用靶点提供条件.
Jagged-1단백속우Noah신호통로적배체지일,이Notch신호통로시개도세포화세포지간접촉적주요신호통로지일,재조혈미배경중조절조혈세포증식여분화적과정중기중요작용.위연구Notch신호통로중수체여배체결합후적생물학공능급Notch신호통로재골수기질세포영향세포내약적작용궤제,구건과표체Jagged-1단백적NIH-3T3세포주.구건함Jagged-1전편마구기인적pEGFP-IRES2-Jagged-1진핵표체재체.결과표명,중조질립전염포유동물세포NIH-3T3후,Western blot분석증실전염후NIH-3T3세포고효표체Jagged-1단백;경과선택성배양기사선급유한희석법도취단극륭세포후,류식세포술(FCM)분석증실건립기과표체Jagged-1단백적단극륭세포모형,즉NIH-3T3-pEGFP-IRES2-Jagged-1세포주.결론:본연구성공구건료Jagged-1진핵표체재체,병건립료은정전염적단극륭세포주.과표체Jagged-1단백적NIH-3T3단극륭세포주적구건위아문연구골수기질세포상관적세포내약적작용궤제병위발현신적약물작용파점제공조건.