解剖学杂志
解剖學雜誌
해부학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANATOMY
2012年
1期
72-74
,共3页
蔡志平%李朝晖%石素琴%崔慧先%贾建新%霍东升
蔡誌平%李朝暉%石素琴%崔慧先%賈建新%霍東升
채지평%리조휘%석소금%최혜선%가건신%곽동승
海马%神经元%凋亡%Bax%Bcl-2%Hoechst 33258%睾酮%自由基
海馬%神經元%凋亡%Bax%Bcl-2%Hoechst 33258%睪酮%自由基
해마%신경원%조망%Bax%Bcl-2%Hoechst 33258%고동%자유기
目的:用荧光染色和免疫印迹方法观察睾酮发挥神经保护作用中是否有抗神经元凋亡机制的参与.方法:大鼠原代培养10d海马神经元,按实验分为对照组、H2O2处理组、预先加入睾酮后再暴露于H2O2组.Hoechst 33258显色,荧光显微镜下观察拍照.原代培养海马神经元Bcl-2和Bax蛋白进行免疫分析.结果:原代培养海马神经元,Hoechst 33258显色后神经元呈均匀蓝色光,胞核明显.在H2O2组(100μm)可见凋亡的细胞,胞核呈深染半月形或碎块状荧光,突起不明显.预先加入睾酮组再暴露于H2O2,海马神经元可见细胞核染色明显,胞核清楚,无明显核碎片.免疫印迹法显示对照组海马神经元有极少量Bcl-2与Bax表达.加入H2O2后细胞Bax表达增加,而Bcl-2表达下降,与对照组相比,差异有统计学意义.提前加入睾酮后暴露于100μmH2O2,可见Bcl-2表达增加,Bax表达下降,与H2O2组比较,差异有统计学意义.结论:自由基对原代培养海马神经元的损伤机制中,有细胞凋亡机制参与,预先给予睾酮后抗凋亡蛋白增加,而凋亡相关蛋白表达减少.
目的:用熒光染色和免疫印跡方法觀察睪酮髮揮神經保護作用中是否有抗神經元凋亡機製的參與.方法:大鼠原代培養10d海馬神經元,按實驗分為對照組、H2O2處理組、預先加入睪酮後再暴露于H2O2組.Hoechst 33258顯色,熒光顯微鏡下觀察拍照.原代培養海馬神經元Bcl-2和Bax蛋白進行免疫分析.結果:原代培養海馬神經元,Hoechst 33258顯色後神經元呈均勻藍色光,胞覈明顯.在H2O2組(100μm)可見凋亡的細胞,胞覈呈深染半月形或碎塊狀熒光,突起不明顯.預先加入睪酮組再暴露于H2O2,海馬神經元可見細胞覈染色明顯,胞覈清楚,無明顯覈碎片.免疫印跡法顯示對照組海馬神經元有極少量Bcl-2與Bax錶達.加入H2O2後細胞Bax錶達增加,而Bcl-2錶達下降,與對照組相比,差異有統計學意義.提前加入睪酮後暴露于100μmH2O2,可見Bcl-2錶達增加,Bax錶達下降,與H2O2組比較,差異有統計學意義.結論:自由基對原代培養海馬神經元的損傷機製中,有細胞凋亡機製參與,預先給予睪酮後抗凋亡蛋白增加,而凋亡相關蛋白錶達減少.
목적:용형광염색화면역인적방법관찰고동발휘신경보호작용중시부유항신경원조망궤제적삼여.방법:대서원대배양10d해마신경원,안실험분위대조조、H2O2처리조、예선가입고동후재폭로우H2O2조.Hoechst 33258현색,형광현미경하관찰박조.원대배양해마신경원Bcl-2화Bax단백진행면역분석.결과:원대배양해마신경원,Hoechst 33258현색후신경원정균균람색광,포핵명현.재H2O2조(100μm)가견조망적세포,포핵정심염반월형혹쇄괴상형광,돌기불명현.예선가입고동조재폭로우H2O2,해마신경원가견세포핵염색명현,포핵청초,무명현핵쇄편.면역인적법현시대조조해마신경원유겁소량Bcl-2여Bax표체.가입H2O2후세포Bax표체증가,이Bcl-2표체하강,여대조조상비,차이유통계학의의.제전가입고동후폭로우100μmH2O2,가견Bcl-2표체증가,Bax표체하강,여H2O2조비교,차이유통계학의의.결론:자유기대원대배양해마신경원적손상궤제중,유세포조망궤제삼여,예선급여고동후항조망단백증가,이조망상관단백표체감소.
