基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
3期
278-282
,共5页
卡米拉·阿不里米提%仉红刚%马可%王琴%张秋菊%修瑞娟
卡米拉·阿不裏米提%仉紅剛%馬可%王琴%張鞦菊%脩瑞娟
잡미랍·아불리미제%장홍강%마가%왕금%장추국%수서연
SELDI%Tricine-SDS-PAGE%双向凝胶电泳%质谱
SELDI%Tricine-SDS-PAGE%雙嚮凝膠電泳%質譜
SELDI%Tricine-SDS-PAGE%쌍향응효전영%질보
目的 探讨以SELDI蛋白质芯片筛选后的细胞差异表达蛋白的分离和鉴定方法及其意义.方法 以经体外培养及10 μmol/L褪黑素药物干预的内皮祖细胞差异表达蛋白质为研究对象,分别采用Tricine-SDS-PAGE和双向凝胶电泳方法进行差异蛋白分离及结果比较,以FT-MS二级质谱鉴定.结果 经Tricine-SDS-PAGE分离后,选取分子量为53 ku左右的趋势性差异表达蛋白进行FT-MS分析,质谱鉴定为微管蛋白-α3(吻合度评分为87).经双向凝胶电泳分离后,于凝胶近酸性端、分子质量在72 ～95 ku之间区域,选取蛋白表达量较高的一点,质谱鉴定其为人热休克蛋白90-α(吻合度评分为91).结论 Tricine-SDS-PAGE对于大致35～62 ku范围的蛋白分离较清晰、重复性好且样品用量少,2-DE对最低上样量有较严格要求,但它能提供分子质量、等电点双重参数来更准确定位所感兴趣蛋白点,且对大分子质量蛋白的分离效果更佳,经质谱鉴定结果理想.
目的 探討以SELDI蛋白質芯片篩選後的細胞差異錶達蛋白的分離和鑒定方法及其意義.方法 以經體外培養及10 μmol/L褪黑素藥物榦預的內皮祖細胞差異錶達蛋白質為研究對象,分彆採用Tricine-SDS-PAGE和雙嚮凝膠電泳方法進行差異蛋白分離及結果比較,以FT-MS二級質譜鑒定.結果 經Tricine-SDS-PAGE分離後,選取分子量為53 ku左右的趨勢性差異錶達蛋白進行FT-MS分析,質譜鑒定為微管蛋白-α3(吻閤度評分為87).經雙嚮凝膠電泳分離後,于凝膠近痠性耑、分子質量在72 ～95 ku之間區域,選取蛋白錶達量較高的一點,質譜鑒定其為人熱休剋蛋白90-α(吻閤度評分為91).結論 Tricine-SDS-PAGE對于大緻35～62 ku範圍的蛋白分離較清晰、重複性好且樣品用量少,2-DE對最低上樣量有較嚴格要求,但它能提供分子質量、等電點雙重參數來更準確定位所感興趣蛋白點,且對大分子質量蛋白的分離效果更佳,經質譜鑒定結果理想.
목적 탐토이SELDI단백질심편사선후적세포차이표체단백적분리화감정방법급기의의.방법 이경체외배양급10 μmol/L퇴흑소약물간예적내피조세포차이표체단백질위연구대상,분별채용Tricine-SDS-PAGE화쌍향응효전영방법진행차이단백분리급결과비교,이FT-MS이급질보감정.결과 경Tricine-SDS-PAGE분리후,선취분자량위53 ku좌우적추세성차이표체단백진행FT-MS분석,질보감정위미관단백-α3(문합도평분위87).경쌍향응효전영분리후,우응효근산성단、분자질량재72 ～95 ku지간구역,선취단백표체량교고적일점,질보감정기위인열휴극단백90-α(문합도평분위91).결론 Tricine-SDS-PAGE대우대치35～62 ku범위적단백분리교청석、중복성호차양품용량소,2-DE대최저상양량유교엄격요구,단타능제공분자질량、등전점쌍중삼수래경준학정위소감흥취단백점,차대대분자질량단백적분리효과경가,경질보감정결과이상.
