中华实验和临床病毒学杂志
中華實驗和臨床病毒學雜誌
중화실험화림상병독학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
2010年
1期
59-61
,共3页
沈宏辉%侯俊%胡燕%白冰珂%王志杰%于湘晖%孔维%刘泽%貌盼勇
瀋宏輝%侯俊%鬍燕%白冰珂%王誌傑%于湘暉%孔維%劉澤%貌盼勇
침굉휘%후준%호연%백빙가%왕지걸%우상휘%공유%류택%모반용
脊髓灰质炎病毒%疫苗%克隆,分子%突变
脊髓灰質炎病毒%疫苗%剋隆,分子%突變
척수회질염병독%역묘%극륭,분자%돌변
Poliovirus%Vaccine%Cloning,molecular%Mutation
目的 构建脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ的全基因序列克隆.方法 利用分子生物学技术,通过分段扩增和酶切连接逐步构建插入脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ全基因序列的质粒,采用单引物二次PCR法引入点突变,并通过酶切、测序等方法进行鉴定.结果 在pWSK29载体中成功插入脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ全基因序列,酶切鉴定正确,序列测定显示有9个核苷酸变异.结论 成功构建脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ的全基因序列克隆,为进一步改造并研究其功能特别是3D聚合酶的功能打下了基础.
目的 構建脊髓灰質炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ的全基因序列剋隆.方法 利用分子生物學技術,通過分段擴增和酶切連接逐步構建插入脊髓灰質炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ全基因序列的質粒,採用單引物二次PCR法引入點突變,併通過酶切、測序等方法進行鑒定.結果 在pWSK29載體中成功插入脊髓灰質炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ全基因序列,酶切鑒定正確,序列測定顯示有9箇覈苷痠變異.結論 成功構建脊髓灰質炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ的全基因序列剋隆,為進一步改造併研究其功能特彆是3D聚閤酶的功能打下瞭基礎.
목적 구건척수회질염병독역묘주Sabin Ⅰ적전기인서렬극륭.방법 이용분자생물학기술,통과분단확증화매절련접축보구건삽입척수회질염병독역묘주Sabin Ⅰ전기인서렬적질립,채용단인물이차PCR법인입점돌변,병통과매절、측서등방법진행감정.결과 재pWSK29재체중성공삽입척수회질염병독역묘주Sabin Ⅰ전기인서렬,매절감정정학,서렬측정현시유9개핵감산변이.결론 성공구건척수회질염병독역묘주Sabin Ⅰ적전기인서렬극륭,위진일보개조병연구기공능특별시3D취합매적공능타하료기출.
Objective To develop a vector inserted with complete genome of poliovirus strain Sabin Ⅰ. Methods The 3 fragments of the complete genome of Sabin Ⅰ was amplified and cloned to pEASY-T3 by molecular biological technology. These cloned pEASY-T3 were then digested by Restriction enzymes and ligated to pWSK29 step by step and identified. Results The complete genome of poliovirus strain Sabin Ⅰ was successfully cloned into vector pWSK29 with 9 nucleotide mutations. Conclusion The complete genome plasmid was constructed and it provided a basis for further research of the function of Sabin Ⅰ.
