听力学及言语疾病杂志
聽力學及言語疾病雜誌
은역학급언어질병잡지
JOURNAL OF AUDIOLOGY AND SPEECH PATHOLOGY
2004年
4期
235-238
,共4页
肖自安%谢鼎华%房海燕%黄亮群%施小六%夏家辉
肖自安%謝鼎華%房海燕%黃亮群%施小六%夏傢輝
초자안%사정화%방해연%황량군%시소륙%하가휘
酵母双杂交技术%耳聋基因%克隆
酵母雙雜交技術%耳聾基因%剋隆
효모쌍잡교기술%이롱기인%극륭
目的在耳聋基因功能的蛋白质相互作用研究领域建立酵母双杂交实验技术,探讨第三代酵母双杂交系统在该领域的应用价值.方法利用第三代MATCHMAKER GAL4酵母双杂交系统,以最常见的耳聋基因GJB2(Cx26)为诱饵,以人胎脑cDNA文库为猎物,钓取Cx26的相互作用蛋白质的阳性克隆,DNA测序阳性克隆并行生物信息学分析.结果从胎脑文库筛选到Cx26互作蛋白的56个阳性克隆,对其中26个克隆分析认定为11个独立克隆,DNA测序发现3个克隆是已克隆基因,8个克隆是新基因序列.结论第三代MATCHMAKER GAL4酵母双杂交系统是筛选Cx26相互作用蛋白质的一个可靠的实验手段,酵母双杂交技术可用于耳聋基因的蛋白质功能研究领域.
目的在耳聾基因功能的蛋白質相互作用研究領域建立酵母雙雜交實驗技術,探討第三代酵母雙雜交繫統在該領域的應用價值.方法利用第三代MATCHMAKER GAL4酵母雙雜交繫統,以最常見的耳聾基因GJB2(Cx26)為誘餌,以人胎腦cDNA文庫為獵物,釣取Cx26的相互作用蛋白質的暘性剋隆,DNA測序暘性剋隆併行生物信息學分析.結果從胎腦文庫篩選到Cx26互作蛋白的56箇暘性剋隆,對其中26箇剋隆分析認定為11箇獨立剋隆,DNA測序髮現3箇剋隆是已剋隆基因,8箇剋隆是新基因序列.結論第三代MATCHMAKER GAL4酵母雙雜交繫統是篩選Cx26相互作用蛋白質的一箇可靠的實驗手段,酵母雙雜交技術可用于耳聾基因的蛋白質功能研究領域.
목적재이롱기인공능적단백질상호작용연구영역건립효모쌍잡교실험기술,탐토제삼대효모쌍잡교계통재해영역적응용개치.방법이용제삼대MATCHMAKER GAL4효모쌍잡교계통,이최상견적이롱기인GJB2(Cx26)위유이,이인태뇌cDNA문고위작물,조취Cx26적상호작용단백질적양성극륭,DNA측서양성극륭병행생물신식학분석.결과종태뇌문고사선도Cx26호작단백적56개양성극륭,대기중26개극륭분석인정위11개독립극륭,DNA측서발현3개극륭시이극륭기인,8개극륭시신기인서렬.결론제삼대MATCHMAKER GAL4효모쌍잡교계통시사선Cx26상호작용단백질적일개가고적실험수단,효모쌍잡교기술가용우이롱기인적단백질공능연구영역.
