选择性扩增外周血和支气管肺泡灌洗液中γδT细胞的研究
선택성확증외주혈화지기관폐포관세액중γδT세포적연구
The isolation and expension of γδT cells in peripheral blood and bronchoalveolar lavage fluid
  • 万方数据
    细胞与分子免疫学杂志 세포여분자면역학잡지

    2004年 3期 337-339 ,共3页

    李超乾%徐永健%陈仕新%倪望%钟小宁%杨丹蕾%刘先胜%张珍祥

    리초건%서영건%진사신%예망%종소저%양단뢰%류선성%장진상

    γδT细胞%培养%支气管肺泡灌洗液%攻击洗淘法 γδT細胞%培養%支氣管肺泡灌洗液%攻擊洗淘法
    γδT세포%배양%지기관폐포관세액%공격세도법
    目的: 探讨选择性扩增外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中γδT细胞的方法, 以获得高纯度的γδT细胞亚群.方法: 应用梯度离心法分离大鼠(n=10)外周血和BALF中的单个核细胞, 经贴壁除去单核/巨噬细胞后, 用补体攻击αβT细胞, 再用抗TCRγδ单克隆抗体(mAb)通过固相法加IL-2刺激选择性培养扩增γδT细胞(简称"攻击洗淘法"); 通过细胞生长曲线观察细胞增殖变化, 采用免疫组化法和流式细胞仪检测鉴定γδT细胞纯度.结果: PBMC和BALF中的γδT细胞在抗TCRγδ mAb和IL-2存在下, 无须再用抗原刺激, 能维持较长时间增殖; 经"攻击洗淘法"纯化后扩增的γδT细胞纯度达到81%～99%.结论: "攻击洗淘法"能高度纯化扩增外周血和BALF中的γδT细胞.
    목적: 탐토선택성확증외주혈화지기관폐포관세액(BALF)중γδT세포적방법, 이획득고순도적γδT세포아군.방법: 응용제도리심법분리대서(n=10)외주혈화BALF중적단개핵세포, 경첩벽제거단핵/거서세포후, 용보체공격αβT세포, 재용항TCRγδ단극륭항체(mAb)통과고상법가IL-2자격선택성배양확증γδT세포(간칭"공격세도법"); 통과세포생장곡선관찰세포증식변화, 채용면역조화법화류식세포의검측감정γδT세포순도.결과: PBMC화BALF중적γδT세포재항TCRγδ mAb화IL-2존재하, 무수재용항원자격, 능유지교장시간증식; 경"공격세도법"순화후확증적γδT세포순도체도81%～99%.결론: "공격세도법"능고도순화확증외주혈화BALF중적γδT세포.
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