CAJ | 학술논문

目的:研究人血清中淀粉样蛋白P(serum amyloid P,SAP)与血浆脂蛋白中高密度脂蛋白(high densitylipoprotein,HDL)、极低密度脂蛋白(verylow density lipoprotein,VLDL)和低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)相互作用机制,为了解动脉粥样硬化和淀粉样变性疾病的发病机制提供理论依据.方法:①Sepharose 4B(Pharmacia)亲和层析法提取人血清SAP,DEAE-Sepharose层析纯化.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与标准SAP(Sigma)检测.②采用免疫探针生物素化试剂盒(Sigma)以1:10比例接合于生物素氨基己酸-N-羟基-硫琥珀酰亚胺酯.得到生物素-SAP.③VLDL,LDL,HDL用超速离心法分离.④以四甲基联苯胺(TMBZ)底物试剂盒用固相平板测定法检测SAP与脂蛋白相互结合.结果:①生理条件的Ca2+水平下,生物素-SAP以剂量依赖方式选择性地与HDL,VLDL结合.当SAP水平分别达到1.5 nmol/L和2 mol/L时,SAP与HDL, VLDL的结合达到半饱和,当SAP水平达到4 nmol/L和16 nmol/L时,SAP与HDL,VLDL结合达到饱和.②SAP与HDL和VLDL的结合具有Ca2+依赖性.③EDTA可影响SAP和HDL,VLDL结合.④无论有无Ca2+和EDTA存在,未发现SAP和LDL间的结合.结论:SAP与HDL和VLDL结合而不与LDL结合.
목적:연구인혈청중정분양단백P(serum amyloid P,SAP)여혈장지단백중고밀도지단백(high densitylipoprotein,HDL)、겁저밀도지단백(verylow density lipoprotein,VLDL)화저밀도지단백(low density lipoprotein,LDL)상호작용궤제,위료해동맥죽양경화화정분양변성질병적발병궤제제공이론의거.방법:①Sepharose 4B(Pharmacia)친화층석법제취인혈청SAP,DEAE-Sepharose층석순화.SDS-취병희선알응효전영여표준SAP(Sigma)검측.②채용면역탐침생물소화시제합(Sigma)이1:10비례접합우생물소안기기산-N-간기-류호박선아알지.득도생물소-SAP.③VLDL,LDL,HDL용초속리심법분리.④이사갑기련분알(TMBZ)저물시제합용고상평판측정법검측SAP여지단백상호결합.결과:①생리조건적Ca2+수평하,생물소-SAP이제량의뢰방식선택성지여HDL,VLDL결합.당SAP수평분별체도1.5 nmol/L화2 mol/L시,SAP여HDL, VLDL적결합체도반포화,당SAP수평체도4 nmol/L화16 nmol/L시,SAP여HDL,VLDL결합체도포화.②SAP여HDL화VLDL적결합구유Ca2+의뢰성.③EDTA가영향SAP화HDL,VLDL결합.④무론유무Ca2+화EDTA존재,미발현SAP화LDL간적결합.결론:SAP여HDL화VLDL결합이불여LDL결합.