中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2006年
11期
1328-1330
,共3页
蒋百华%马小琴%徐玲玲%赵文静
蔣百華%馬小琴%徐玲玲%趙文靜
장백화%마소금%서령령%조문정
血管紧张素Ⅱ%基因,胶原%启动子
血管緊張素Ⅱ%基因,膠原%啟動子
혈관긴장소Ⅱ%기인,효원%계동자
目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人皮肤成纤维细胞增殖活性及人α1(Ⅰ)原胶原基因启动调控序列的作用.方法 用组织块法原代培养人皮肤成纤维细胞并进行传代培养作为本研究的模型细胞.①采用四甲基偶氮唑盐(MTT)掺入法测定经不同浓度血管紧张素Ⅱ处理24 h后成纤维细胞的增殖情况.②构建含长短不一的人α1(Ⅰ)原胶原基因5'侧翼区序列与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的重组体pCOLH1 1.5、pCOLH1 2.5,用FUGENE 6将重组体转染至人皮肤成纤维细胞,ELISA法测定不同浓度血管紧张素Ⅱ作用24 h后,转染有重组体的成纤维细胞的CAT表达量.结果 ①在1×10-9~1×10-5 mol/L血管紧张素Ⅱ处理24 h后,各浓度组成纤维细胞增殖值与对照组之间不存在剂量依赖关系(P>0.05).②2种重组体转染成纤维细胞,并经血管紧张素Ⅱ处理24 h后,转染细胞的CAT相对表达量测定:pCOLH1 2.5组与对照组之间,较高浓度组(1×10-5 mol/L)与较低浓度组(10×10-6 mol/L)之间存在显著差异(P<0.05),且存在剂量依赖关系,pCOLH1 1.5组与对照组之间不存在明显差异(P>0.05).结论 血管紧张素Ⅱ在1×10-9~1×10-5 mol/L浓度范围内,对所研究的模型细胞--人皮肤成纤维细胞增殖不存在剂量依赖关系.血管紧张素Ⅱ对胶原基因启动序列pCOLH1 2.5具有正性调控作用,并存在剂量依赖关系.
目的 探討血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)對人皮膚成纖維細胞增殖活性及人α1(Ⅰ)原膠原基因啟動調控序列的作用.方法 用組織塊法原代培養人皮膚成纖維細胞併進行傳代培養作為本研究的模型細胞.①採用四甲基偶氮唑鹽(MTT)摻入法測定經不同濃度血管緊張素Ⅱ處理24 h後成纖維細胞的增殖情況.②構建含長短不一的人α1(Ⅰ)原膠原基因5'側翼區序列與氯黴素乙酰基轉移酶(CAT)報告基因的重組體pCOLH1 1.5、pCOLH1 2.5,用FUGENE 6將重組體轉染至人皮膚成纖維細胞,ELISA法測定不同濃度血管緊張素Ⅱ作用24 h後,轉染有重組體的成纖維細胞的CAT錶達量.結果 ①在1×10-9~1×10-5 mol/L血管緊張素Ⅱ處理24 h後,各濃度組成纖維細胞增殖值與對照組之間不存在劑量依賴關繫(P>0.05).②2種重組體轉染成纖維細胞,併經血管緊張素Ⅱ處理24 h後,轉染細胞的CAT相對錶達量測定:pCOLH1 2.5組與對照組之間,較高濃度組(1×10-5 mol/L)與較低濃度組(10×10-6 mol/L)之間存在顯著差異(P<0.05),且存在劑量依賴關繫,pCOLH1 1.5組與對照組之間不存在明顯差異(P>0.05).結論 血管緊張素Ⅱ在1×10-9~1×10-5 mol/L濃度範圍內,對所研究的模型細胞--人皮膚成纖維細胞增殖不存在劑量依賴關繫.血管緊張素Ⅱ對膠原基因啟動序列pCOLH1 2.5具有正性調控作用,併存在劑量依賴關繫.
목적 탐토혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)대인피부성섬유세포증식활성급인α1(Ⅰ)원효원기인계동조공서렬적작용.방법 용조직괴법원대배양인피부성섬유세포병진행전대배양작위본연구적모형세포.①채용사갑기우담서염(MTT)참입법측정경불동농도혈관긴장소Ⅱ처리24 h후성섬유세포적증식정황.②구건함장단불일적인α1(Ⅰ)원효원기인5'측익구서렬여록매소을선기전이매(CAT)보고기인적중조체pCOLH1 1.5、pCOLH1 2.5,용FUGENE 6장중조체전염지인피부성섬유세포,ELISA법측정불동농도혈관긴장소Ⅱ작용24 h후,전염유중조체적성섬유세포적CAT표체량.결과 ①재1×10-9~1×10-5 mol/L혈관긴장소Ⅱ처리24 h후,각농도조성섬유세포증식치여대조조지간불존재제량의뢰관계(P>0.05).②2충중조체전염성섬유세포,병경혈관긴장소Ⅱ처리24 h후,전염세포적CAT상대표체량측정:pCOLH1 2.5조여대조조지간,교고농도조(1×10-5 mol/L)여교저농도조(10×10-6 mol/L)지간존재현저차이(P<0.05),차존재제량의뢰관계,pCOLH1 1.5조여대조조지간불존재명현차이(P>0.05).결론 혈관긴장소Ⅱ재1×10-9~1×10-5 mol/L농도범위내,대소연구적모형세포--인피부성섬유세포증식불존재제량의뢰관계.혈관긴장소Ⅱ대효원기인계동서렬pCOLH1 2.5구유정성조공작용,병존재제량의뢰관계.